1、目的:研究和厚樸酚聯(lián)合阿糖胞苷在急性髓系白血病細(xì)胞株THP-1細(xì)胞增殖和凋亡的協(xié)同作用，探索其潛在的抗急性髓系白血病機(jī)制，為治療急性髓系白血病提供新的方法。
　　方法:細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察和厚樸酚或阿糖胞苷單獨(dú)或聯(lián)合作用對(duì)THP-1細(xì)胞形態(tài)的影響;CCK8法和流式細(xì)胞術(shù)（細(xì)胞凋亡和周期）檢測(cè)二者單獨(dú)或聯(lián)合作用于THP-1細(xì)胞對(duì)細(xì)胞增殖和凋亡的影響;Apolive-GloTM雙重檢測(cè)分析單藥或聯(lián)合用藥處理對(duì)細(xì)胞活力和caspase3/7表

2、達(dá)的影響;MicroRNA基因芯片分析二者單獨(dú)或聯(lián)合作用對(duì)THP-1細(xì)胞MicroRNA的表達(dá)的影響，以及靶基因的預(yù)測(cè)、篩選與鑒定;采用單因素方差分析(one way ANOVA)，以P＜0.05作為有差別統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:(1)細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果顯示，和厚樸酚或阿糖胞苷單獨(dú)或聯(lián)合作用36小時(shí)，都可以對(duì)THP-1細(xì)胞形態(tài)產(chǎn)生影響，其中聯(lián)合用藥組細(xì)胞形態(tài)變化更為明顯;(2) CCK-8結(jié)果顯示:和厚樸酚6μmol/l和8μmo

3、l/l單獨(dú)作用時(shí)，對(duì)THP-1細(xì)胞增殖有抑制作用;單用1μmol/l阿糖胞苷時(shí)抑制作用不明顯;二者聯(lián)合后，與單用和厚樸酚及正常組分別比較，2μmol/l，4μmol/l及6μmol/l和厚樸酚聯(lián)合1μmol/l阿糖胞苷時(shí)，差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);(3)流式細(xì)胞術(shù)分析結(jié)果顯示:和厚樸酚在2μmol/l,4μmol/l及8μmol/l濃度下單獨(dú)作用36小時(shí)，THP-1細(xì)胞的總凋亡率（早期凋亡率+晚期凋亡率）分別為8.37±0.6

4、1％，11.78±0.82％，46.67±0.69％，阿糖胞苷單藥處理組和正常對(duì)照組分別為12.81±0.35％和6.64±0.87％，僅高濃度和厚樸酚（8μmol/l）作用時(shí)可誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生明顯凋亡;然而和厚樸酚聯(lián)合1μmol/l阿糖胞苷處理36小時(shí)后，THP-1細(xì)胞總凋亡率依次為24.8±0.73％，26.49±1.85％及48.77±1.55％，與單藥組和正常對(duì)照組相比，其誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡效應(yīng)更加明顯;(4)細(xì)胞周期方面:和厚樸酚單獨(dú)作

5、用于THP-1細(xì)胞12小時(shí)后，可以使細(xì)胞阻滯在G0/G1期，下調(diào)S期細(xì)胞比例，且與濃度成正相關(guān)，聯(lián)合阿糖胞苷組較單藥組有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05);(5)雙重檢測(cè)結(jié)果顯示，和厚樸酚可抑制THP-1細(xì)胞活力，激活caspase3/7表達(dá)，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，而聯(lián)合阿糖胞苷后這種效應(yīng)顯著增強(qiáng);提示二者聯(lián)合在抑制細(xì)胞活力和促進(jìn)細(xì)胞凋亡方面有協(xié)同作用;(6) MicroRNA結(jié)果顯示和厚樸酚單藥或阿糖胞苷單藥或二者聯(lián)合用藥可引起THP-1細(xì)胞中約