甲型副傷寒沙門菌h1A-spaO融合基因構建及其表達產(chǎn)物免疫保護作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：構建甲型副傷寒沙門菌h1a-spaO融合基因及其原核表達系統(tǒng)，確定重組表達產(chǎn)物rH1a-SpaO免疫保護作用。
　　方法：采用柔性肽序列連接引物PCR構建并擴增h1a與spaO基因的融合基因h1a-spaO，T-A克隆后測序。采用常規(guī)基因工程方法構建h1a-spaO融合基因原核表達系統(tǒng)，SDS-PAGE檢測rH1 a-SpaO表達情況。采用Western Blot鑒定rH1a-SpaO抗原性和免疫反應性，微量肥達試驗確定rH

2、1a-SpaO抗血清凝集甲型副傷寒沙門菌的能力。采用小鼠感染模型了解rH1a-SpaO對甲型副傷寒沙門菌致死性感染的保護作用并與等量單一重組表達蛋白H1a(rH1a)及SpaO(rSpaO)比較。
　　結果：所構建的h1a-spaO融合基因與單一h1a或spaO基因核苷酸和氨基酸序列相似性均為100％。h1a-spaO融合基因原核表達系統(tǒng)能高效表達rH1a-SpaO。rH1a-SpaO能與rH1a或rSpaO抗血清結合， rH1a

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