1、目的：探究胱硫醚-β-合酶（cystathionine-β-synthase,CBS）在肝癌細(xì)胞中的作用及QIC2誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡的作用及機(jī)制。
　　方法：RT-PCR及Western blot方法檢測(cè)CBS在肝癌及肝正常細(xì)胞中的表達(dá)水平；MTT及EdU檢測(cè)下調(diào)CBS的表達(dá)或抑制CBS的活性對(duì)肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的影響；流式細(xì)胞儀分析下調(diào)CBS的表達(dá)對(duì)肝癌細(xì)胞凋亡的影響；Western blot檢測(cè)下調(diào)CBS的表達(dá)對(duì)凋亡相關(guān)蛋白及HO

2、-1蛋白表達(dá)的影響；通過(guò)Western blot及MTT法從化合物QICs(QIC0,QIC1,QIC2和QIC3)中篩選具有抗肝癌活性的CBS抑制劑；應(yīng)用MTT方法檢測(cè)篩選出的QIC2對(duì)肝癌SMMC-7721細(xì)胞的抗癌活性，以阿霉素和蘇尼替尼為陽(yáng)性對(duì)照；采用EdU實(shí)驗(yàn)檢測(cè)QIC2對(duì)肝癌SMMC-7721細(xì)胞增殖的影響；流式細(xì)胞儀分析QIC2對(duì)肝癌SMMC-7721細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡的影響；Western blot方法檢測(cè)QIC2對(duì)肝癌

3、SMMC-7721細(xì)胞中CBS、HO-1以及凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響；DCF法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)ROS水平；DTNB法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)GSH水平。
　　結(jié)果：
　　1、RT-PCR及Western blot結(jié)果顯示，與人正常肝細(xì)胞比較，在肝癌SMMC-7721及HepG2細(xì)胞中CBS mRNA和蛋白水平均呈過(guò)表達(dá)。
　　2、下調(diào)CBS表達(dá)或抑制CBS活性可抑制肝癌SMMC-7721細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。
　　3、下調(diào)CBS表達(dá)或抑制

4、CBS活性可誘導(dǎo)肝癌SMMC-7721細(xì)胞凋亡，增加凋亡相關(guān)蛋白Bax/Bcl-2比值，激活caspase-3級(jí)聯(lián)反應(yīng)。
　　4、下調(diào)CBS表達(dá)可抑制肝癌SMMC-7721細(xì)胞中HO-1表達(dá)，并增加細(xì)胞內(nèi)的ROS水平。
　　5、QICs類(lèi)化合物中，QIC2明顯抑制肝癌SMMC-7721細(xì)胞中CBS的表達(dá)及肝癌SMMC-7721細(xì)胞的生長(zhǎng)。
　　6、QIC2對(duì)肝癌SMMC-7721細(xì)胞的抑制活性明顯強(qiáng)于陽(yáng)性對(duì)照蘇尼替尼，

5、但弱于陽(yáng)性對(duì)照阿霉素。
　　7、QIC2可抑制肝癌SMMC-7721細(xì)胞增殖。
　　8、QIC2可誘導(dǎo)肝癌SMMC-7721細(xì)胞凋亡，激活caspase3級(jí)聯(lián)反應(yīng)。
　　9、QIC2可抑制肝癌SMMC-7721細(xì)胞中HO-1表達(dá)，增加細(xì)胞中ROS水平，降低細(xì)胞中GSH水平，由此增加細(xì)胞的氧化應(yīng)激。
　　結(jié)論：
　　1、CBS可調(diào)控肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖及凋亡。
　　2、CBS對(duì)肝癌細(xì)胞凋亡的調(diào)控作用可能