1、以鹽敏感水稻品種武運(yùn)粳8號(hào)為材料，研究了鹽脅迫對其根尖細(xì)胞程序性死亡(PCD)的誘導(dǎo)情況，確定了PCD的誘導(dǎo)條件。結(jié)果表明：高濃度鹽脅迫(500 mmol/LNaCl)后，水稻根尖細(xì)胞呈現(xiàn)明顯的PCD特征，例如：DNA片段化，細(xì)胞核濃縮變形以及TUNEL，陽性反應(yīng)。這些細(xì)胞核事件從處理4 h后開始出現(xiàn)，隨著時(shí)間延長，更加明顯。此外，鹽脅迫處理還能引起細(xì)胞色素c(Cytc)從線粒體釋放到細(xì)胞質(zhì)，該現(xiàn)象在脅迫處理2h即被觀察到，早于上述細(xì)胞

2、核事件。 以上述實(shí)驗(yàn)體系為模型，研究了PCD對細(xì)胞質(zhì)，細(xì)胞核中核酸酶活性的誘導(dǎo)情況，以及PCD相關(guān)核酸酶的性質(zhì)分析。核酸酶活性電泳結(jié)果表明：500molNaCl處理水稻根尖2h后，細(xì)胞質(zhì)，細(xì)胞核組分中都有新的核酸酶活性條帶出現(xiàn)，根據(jù)其亞細(xì)胞定位和分子量分別命名為0sCyt20，0sNuc37。藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞質(zhì)PCD相關(guān)核酸酶0scyt20為Ca2+/Mg2+依賴型，最適pH在7.0，Zn2+、EDTA對其活性都有強(qiáng)烈抑制作

3、用。體外酶切實(shí)驗(yàn)表明，包括0sCyt20在內(nèi)的細(xì)胞質(zhì)核酸酶都不能導(dǎo)致細(xì)胞核染色體DNA發(fā)生特異性切割形成DNA Ladder。細(xì)胞核PCD相關(guān)核酸酶0sNuc37為Zn2+依賴型，最適pH在4.5-6.0，EDTA對其活性有強(qiáng)烈抑制作用。糖結(jié)合試驗(yàn)證明0sNuc37是一個(gè)糖蛋白。體外酶切實(shí)驗(yàn)表明，0sNuc37能夠?qū)е录?xì)胞核染色體DNA發(fā)生特異性切割，形成DNA Ladder。 綜合上述研究結(jié)果，本文鑒定了一個(gè)新的細(xì)胞程序性死亡