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![PDSS2基因過表達影響結腸癌細胞生長的初步研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/10/8/45acf68a-a242-4f1a-8fa9-a623961d4e4d/45acf68a-a242-4f1a-8fa9-a623961d4e4d1.gif)
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文檔簡介
1、目的:通過觀察PDSS2基因過表達對人結腸癌SW480、HCT116細胞的細胞生長、細胞增殖、細胞周期、細胞凋亡、細胞遷移及侵襲能力等生物學行為的影響,為明確PDSS2與結腸癌的關系提供依據。
方法:
1、構建PDSS2過表達質粒(PC3.1-PDSS2);
2、分別轉染結腸癌SW480、HCT116細胞,實驗分為兩組:對照組(SW480組、HCT116組)轉染空白質粒、實驗組(PDSS2組)轉染PDSS2
2、過表達質粒;
3、MTS檢測細胞生長和增殖情況;
4、流式細胞儀檢測細胞周期、細胞凋亡率;
5、Transwell法和劃痕實驗檢測細胞遷移能力和細胞侵襲能力的變化。
結果:(1)MTS檢測細胞增殖:a、SW480實驗組細胞d1、d2、d3增殖率分別為117.54%、161.19%、316.79%,其對照組為127.24%、206.72%、425.00%,差距具有統(tǒng)計學意義(P<0.01);PDSS
3、2過表達d1、d2、d3對SW4080細胞增殖的抑制率分別為7.62%、22.02%、25.46%,對照組為0.00%、0.00%、0.00%,差距具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。b、HCT116實驗組細胞d1、d2、d3增殖率分別為115.04%、150.81%、248.37%,其對照組為118.97%、164.43%、289.33%,差距具有統(tǒng)計學意義(P<0.01);PDSS2過表達d1、d2、d3對HCT116細胞增殖的抑制率分
4、別為5.98%、10.82%、16.53%,對照組為0.00%、0.00%、0.00%,差距具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
?。?)流式細胞儀檢測細胞周期:a、SW480實驗組G1期細胞占70.24%,其對照組59.54%;SW480實驗組S期細胞25.00%、G2期4.77%,均低于其對照組的33.86%、6.60%;b、HCT116實驗組G1期細胞占68.25%,其對照組57.10%;HCT116實驗組S期細胞18.12%
5、、G2期13.63%,均低于其對照組的24.14%、18.76%。
?。?)流式細胞儀檢測細胞凋亡:a、SW480實驗組細胞總凋亡率11.03%,其對照對照組為7.58%(P=0.012)。b、HCT116實驗組細胞總凋亡率為16.03%,其對照組為13.01%(P=0.015)。
?。?)劃痕實驗顯示培養(yǎng)48h后,a、SW480實驗組細胞間距離為|445.62±27.45|,其對照組為|335.03±31.69|;b、
6、HCT116實驗組細胞間距離為|259.34±13.2|,其對照組為|188.38±9.5|。
?。?)Transwell法檢測:a、SW480實驗組遷移細胞數為136.5±13.25,其對照組為350.50±30.17,差距均具有統(tǒng)計學意義(P<0.01);SW480實驗組侵襲細胞數為59.17±9.85,其對照組為140.50±27.08,差距均具有統(tǒng)計學意義(P<0.01);b、HCT116實驗組遷移細胞數為19.83±2
7、.32,其對照組為63.17±16.07,差距均具有統(tǒng)計學意義(P<0.01);SW480實驗組侵襲細胞數為8.83±1.72,其對照組為37.33±4.27,差距均具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
結論:
?。?)PDSS2基因過表達可以抑制結腸癌細胞SW480、HCT116的增殖,阻止其從G1期向S期轉化;
?。?)PDSS2基因過表達可以影響結腸癌細胞SW480、HCT116細胞周期的調節(jié)。
(
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