1、骨橋蛋白（Osteopontin,OPN），是一種分泌型非膠原性富含硅鋁酸的趨化因子樣蛋白，屬小整合素結(jié)合配體N連接糖蛋白（SIBLING）家族成員，在許多腫瘤中具有重要的致癌作用，其配體是整合素和CD44，對(duì)腫瘤細(xì)胞生存、增殖、黏附和遷移等具有多種調(diào)控作用。
　　本課題聚焦OPN對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞的調(diào)控作用，研究發(fā)現(xiàn)OPN可顯著促進(jìn)結(jié)腸癌細(xì)胞株HT29等的增殖。通過進(jìn)一步機(jī)制研究，發(fā)現(xiàn)OPN通過與配體CD44結(jié)合，上調(diào)HT29內(nèi)果蠅Z

2、este基因增強(qiáng)子同源物2（enhancer ofzeste homolog2,EZH2）的表達(dá)。
　　EZH2是多梳蛋白抑制復(fù)合體（polycomb repressor complex2,PRC2）中核心催化蛋白，主要作用是催化3號(hào)組蛋白第27位賴氨酸三甲基化（H3K27me3），從而沉默相關(guān)靶基因，而那些靶基因往往參與決定細(xì)胞命運(yùn)、調(diào)控細(xì)胞周期、細(xì)胞衰老、分化以及腫瘤發(fā)展等。研究報(bào)道EZH2的失調(diào)對(duì)于腫瘤的發(fā)生和發(fā)展具有重要作

3、用，因此可能作為一些腫瘤中有效的治療靶點(diǎn)。
　　我們收集了30例晚期結(jié)腸癌患者血清和腫瘤組織，檢測(cè)發(fā)現(xiàn)患者血清中OPN水平顯著高于健康志愿者；而在腫瘤組織中OPN和EZH2的mRNA水平顯著增高；癌組織中EZ H2的蛋白表達(dá)水平增高，癌旁組織中EZH2的表達(dá)水平較低，藉此提示EZH2對(duì)結(jié)腸癌的發(fā)生發(fā)展具有調(diào)控作用。此外，在荷瘤裸鼠體內(nèi)應(yīng)用EZH2特異性抑制劑（GSK-126）后，可顯著抑制結(jié)腸癌細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)的增殖。因此，以O(shè)PN

4、-EZH2調(diào)控軸為核心的干預(yù)手段可能為臨床診斷和治療結(jié)腸癌提供一定的理論依據(jù)。
　　本論文在完成上述工作的同時(shí)還參與了課題組承擔(dān)的上海市科委自然基金項(xiàng)目《10ZR1426100槲寄生凝集素功能域基因工程蛋白研制與誘導(dǎo)效應(yīng)型γδ-T細(xì)胞抗瘤機(jī)制的研究》中結(jié)腸癌患者外周血γδ-T細(xì)胞的鑒定以及槲寄生凝集素功能域蛋白制備和抗瘤作用的部分研究。通過構(gòu)建包含槲寄生凝集素功能域基因的重組表達(dá)質(zhì)粒，獲得了較多上清表達(dá)的可溶性蛋白，經(jīng)過純化的蛋白