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1、南京林業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文里氏木霉纖維素酶的分離純化與酶學(xué)性質(zhì)研究姓名:于兆海申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):生物化工指導(dǎo)教師:江華20060601Pu尚cationandCharacterizationofCeHulasesfromtheFungusTdchodermareeseiYuZhaohaiSupervisedbyProfessorJiangHua(ConegeofChemicalEngineering,NanjingForestryU
2、niversity210037)June2006AbstractUsingultrafiltration,cationic(CMSepharoseFDandanionic(DEAESepharoscFF)chromatographyandsizeexclusion(SephadexG100),sixcdlulolyticenzymeswerepurifiedfromtheculturebrothofTrichodermareesei:t
3、hreeendoglucanases(EGIEGII,EGffl),twoceUobiohydrolases(CBHI,CBH]I)anda肛gulcosidase(GB)ThesixceHulasesdisplayedonesinglebandonSDSPAGErespectivelyThespecificactivityofEGI正GIIandEGmwitheathoxyinethylceHulosewasestimatedtobe
4、17635IUmg“115396IUmg16422IUmg“1respectivelyForCBHIandCBHII血cspecificactivitywas1686IUmgq482IUmg1respectivelywithmierocelluloseThespecificactivityofthe13gulcosidasewitllsalicinwas31_00IUna91Basicenzymaticcharacteristicofo
5、btainedcellulaseswerestudiedTherelativemolecularweightofEGI,EGII。EGⅢ,CBHI,CBHⅡandGBwas50kD,46kD,25kD,65kD,581kDand75kD,respectivelyKineticsmethodshowedtheKmofEGI,EGII,EGIIIforcarboxymethylcellulosewas670meCmL,846mg/mL,13
6、22mgCmLrespectivelyForCBHIandCBHII,theKmWithmicroceUulosewas137mg/mL’and346mg/mLrespectivelyTheKmofB—gulcosidasewithsalicinwas220mg/mLForEGI,EGII,EGIII,CBHI,CBHⅡandGB,theoptimumtemperturewas55“C,50(2,55“C,60。C,45(2and60。
7、CrespectivelywhiletheiroptimumpHat56,44,50,56,50and50Besides,theeeUulaseshadtherelativelygoodstabilityunder30。C,whileinthetempertureupon80℃theylosttheiractivityquicklyTheceHulaseswererelativelystablewithinpH5ON62EGI和CBHI
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