1、本文主要研究了里氏木霉(Trichoderma reesei)Rut C30纖維素酶單一組分的分離純化和酶學(xué)性質(zhì);纖維素酶單一組分降解纖維素的機(jī)理及纖維低聚糖制備技術(shù);在此基礎(chǔ)上研究纖維低聚糖對(duì)雙歧桿菌的增殖作用及雙歧桿菌代謝纖維低聚糖的產(chǎn)物組成.主要研究結(jié)果如下: 通過(guò)硫酸銨分級(jí)沉淀、HiPrep 26/10 Desalting凝膠過(guò)濾脫鹽、Source 15 Q陰離子交換,里氏木霉纖維素酶得以初步分開(kāi),再經(jīng)過(guò)Source 1

2、5 S陽(yáng)離子交換、HiPrep Sephacryl S-100HR凝膠過(guò)濾、Superdex 75 PrepGrade凝膠過(guò)濾進(jìn)一步分離純化,得到兩個(gè)電泳純內(nèi)切葡聚糖酶組分EGⅠ、EGⅡ和一個(gè)外切葡聚糖酶組分CBHI;經(jīng)SDS-PAGE電泳測(cè)得分子量分別為56.2kDa、52.2kDa和69.0kDa. 研究了內(nèi)切葡聚糖酶EGⅠ、EGⅡ和外切葡聚糖酶CBHI降解纖維素的機(jī)理及纖維低聚糖制備技術(shù).內(nèi)切葡聚糖酶EGⅠ和外切葡聚糖酶C

3、BHI不適合纖維低聚糖的制備.以?xún)?nèi)切葡聚糖酶EGⅡ酶法制備纖維低聚糖,最佳酶用量1IU/g纖維素,最佳酶解時(shí)間90min,制備得到的纖維低聚糖中纖維二糖、纖維三糖和纖維四糖占總糖的比例分別為43.8％、34.8％和7.9％. 以葡萄糖、纖維二糖、纖維低聚糖為碳源增殖青春雙歧桿菌,葡萄糖對(duì)雙歧桿菌的增殖效果最好,其次是纖維低聚糖.菌體濃度增殖倍數(shù)分別為5.95、2.14和2.84倍.青春雙歧桿菌代謝葡萄糖、纖維二糖和纖維低聚糖的主