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文檔簡(jiǎn)介
1、本文成功克隆了河豚IL-4 cDNA全序列,并在畢赤酵母系統(tǒng)中誘導(dǎo)表達(dá)了重組IL-4。河豚IL-4 cDNA:全長(zhǎng)834bp,包括39bp的5'非編碼區(qū)(5'UTR),375bp的3'非編碼區(qū)(3'UTR)和420bp的開(kāi)放閱讀框架(ORF),其翻譯得到的多肽含139個(gè)氨基酸,預(yù)測(cè)分子量約16.131kDa。河豚IL-4基因與已知的哺乳動(dòng)物和鳥(niǎo)類(lèi)有相同的結(jié)構(gòu),即由四個(gè)外顯子和三個(gè)內(nèi)含子組成。它的編碼蛋白與其他同源體有11%-16%的同源
2、相似性。用優(yōu)化條件的RT-PCR半定量估測(cè)IL4在河豚各個(gè)組織中的表達(dá)水平,結(jié)果顯示,IL-4在所選組織中均為組成性表達(dá),包括頭腎、脾臟、肝臟、大腦、鰓、肌肉和心臟,其中頭腎、脾臟和肝臟的表達(dá)量較低。IL-4的組成性表達(dá)與它對(duì)免疫細(xì)胞因子調(diào)節(jié)的潛在作用是相一致的。用2 μ g ConA、2 μ g PHA和2μg PMA的混合誘導(dǎo)劑刺激河豚,可以發(fā)現(xiàn)IL-4在以上所檢測(cè)組織中的表達(dá)量顯著上升,這一結(jié)果也預(yù)示了有絲分裂原激活I(lǐng)L-4的炎癥
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