西瓜高效離體再生體系建立及玻璃化現(xiàn)象研究.pdf_第1頁
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1、SichuanAgriculturalUniversityMasterDissertationEstablishmentofefficientregenerationsystemofwatermeloninvitroandstudyonvitrificationByYonghongXie(VegetableScience)DirectedbyHUanxiuLiSichuanAgriculturalUniversity,Chengdu,6

2、11130Sichuan,PRChinaJune,2016June2010,摘要本試驗以4個西瓜品種‘早春紅玉’、‘早佳8424’和‘抗病京欣’以及實驗室品種編號‘F27’西瓜幼苗為材料,主要研究了西瓜離體再生過程中外植體滅菌方式、基因型、苗齡、外植體類型、各階段培養(yǎng)基中激素種類和濃度等因素的影響。初步探討了降低西瓜不定芽玻璃化率各因素的優(yōu)化,以建立西瓜的高效低玻璃化離體再生體系,為西瓜的遺傳轉(zhuǎn)化和新品種選育提供參考。本試驗主要研究結(jié)果

3、如下:1西瓜高效離體再生體系的建立(1)直接從西瓜種子催芽后長出的幼苗上獲得外植體可以提高外植體供給速度,提高效率。外植體在75%酒精滅菌30s后轉(zhuǎn)入O1%HgCl2滅菌處理10min能有效降低外植體污染率和死亡率,是本試驗最佳滅菌組合。(2)不同基因型的西瓜外植體之間誘導(dǎo)情況差異顯著。同樣誘導(dǎo)培養(yǎng)條件下,抗病京欣的不定芽誘導(dǎo)率和平均誘導(dǎo)芽數(shù)分別達(dá)8254%、493,其次是早佳8424、F27,誘導(dǎo)情況最差的是早春紅玉。(3)不同苗齡的

4、外植體不定芽誘導(dǎo)情況不同,子葉剛剛由黃色轉(zhuǎn)為淺綠色的變色期時誘導(dǎo)率最高。而由于外界環(huán)境條件和種子自身情況的不同,變色期子葉在不同苗齡階段均有分布。因此,本試驗中以變色期來確定外植體生長發(fā)育情況而非生長日期排除了外界條件的影響,獲得了更高的誘導(dǎo)率。(4)本試驗中抗病京欣的頂芽和子葉近軸端兩種外植體的不定芽誘導(dǎo)率均達(dá)到85%以上,但子葉近軸端誘導(dǎo)的不定芽生長健壯,誘導(dǎo)率高,并且便于遺傳轉(zhuǎn)化,為本試驗的最佳外植體。(5)外植體在只添加6BA的

5、培養(yǎng)基中也能誘導(dǎo)產(chǎn)生不定芽,但是濃度過高會使不定芽玻璃化情況加重,應(yīng)控制在4mg/L以內(nèi)。2,4D對西瓜不定芽誘導(dǎo)具有明顯抑制作用,添加2,4一D后不定芽誘導(dǎo)率明顯下降。當(dāng)6BA配合低濃度生長素nA或NAA時比單獨使用能獲得更高的誘導(dǎo)率,且IAA效果優(yōu)于NAA,最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基激素組合為6BA30mg/LIAA02mg/L,誘導(dǎo)率達(dá)9165%,不定芽平均誘導(dǎo)芽數(shù)達(dá)636。(6)不定芽轉(zhuǎn)入添加KT的培養(yǎng)基中能獲得很好的伸長效果,最適濃度為K

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