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文檔簡介
1、本論文通過RT-PCR的方法,研究了擬南芥擴張蛋白AtEXPA1基因的表達,發(fā)現(xiàn)AtEXPA1基因在葉片中的表達量遠遠高于根和花中,在不同脅迫處理下,AtEXPA1基因的應答不同,其中,干旱,低溫(4℃)可以負調控基因表達。而水淹處理結果是隨時間表達量增加,到5小時為最高峰。同時發(fā)現(xiàn)隨著鹽和脫落酸處理的時間增加,AtEXPA1基因表達量下降。 在研究AtEXPA1基因表達特性的基礎上,克隆了AtEXPA1基因的啟動子(翻譯起始
2、密碼子的上游897bp)。首先將啟動子在不同位置缺失,得到不同長度的片段,再連接報告基因GUS,構建了一系列缺失表達載體質粒。通過PEG介導法轉化煙草原生質體。結果表明翻譯起始密碼子上游287bp長的啟動子活性最強。轉化原生質體后,不同條件和試劑處理原生質體,再定量檢測GUS蛋白的活性,發(fā)現(xiàn)AtEXPA1基因的啟動子上AAAG或CTTT與光調控有關,可能與Dof轉錄因子結合,在啟動子上游-897到-626之間存在受冷負調控的元件,在-6
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