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![水稻病原誘導(dǎo)啟動(dòng)子POs2H16順式作用元件的分離與鑒定.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/8/074c0222-3f87-4ea1-9cd6-dd556cc30870/074c0222-3f87-4ea1-9cd6-dd556cc308701.gif)
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文檔簡(jiǎn)介
1、水稻紋枯病是水稻上發(fā)病廣泛且影響嚴(yán)重的真菌性病害,每年都造成水稻大量減產(chǎn),發(fā)病嚴(yán)重的地區(qū)甚至造成絕產(chǎn)。然而由于紋枯病菌融合菌群種類(lèi)復(fù)雜,目前對(duì)其致病機(jī)理以及抗病機(jī)制研究甚少,并且生產(chǎn)上缺少有效的抗病品種,因此積極研究水稻紋枯病抗病分子機(jī)制對(duì)于改良水稻抗病性至關(guān)重要。通過(guò)調(diào)控抗病相關(guān)基因的表達(dá)來(lái)提高植物抗性是抗病分子育種的有效策略之一。啟動(dòng)子是RNA聚合酶特異性識(shí)別和結(jié)合的DNA序列,其啟動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄,是完整基因功能上必不可少的一個(gè)組成部
2、分。它通過(guò)與轉(zhuǎn)錄因子(transcription factor)結(jié)合而參與基因表達(dá)的調(diào)控,進(jìn)而影響機(jī)體的正常功能。利用特異性的病原誘導(dǎo)啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)相關(guān)抗病基因的表達(dá)從而提高植物的抗性,對(duì)于水稻抗紋枯病研究提供了一個(gè)有意義的策略。
前期實(shí)驗(yàn)室通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)水稻 OS2H16基因啟動(dòng)子能夠特異性受到病原菌誘導(dǎo)表達(dá),并且已經(jīng)鑒定到了其主要響應(yīng)區(qū)域位于-513bp至-411bp以及-411bp至-309bp,而在-411bp至-309bp
3、存在GT-1元件,該元件是一個(gè)已鑒定的病原菌以及鹽等響應(yīng)相關(guān)的作用元件。通過(guò)PLACE啟動(dòng)子預(yù)測(cè)軟件其進(jìn)行預(yù)測(cè),并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)在-513bp至-411bp存在已知順式反應(yīng)元件,說(shuō)明在該區(qū)段內(nèi)含有一個(gè)新的能夠響應(yīng)紋枯病菌的順式反應(yīng)元件。本課題重點(diǎn)對(duì)該啟動(dòng)子區(qū)段進(jìn)行了深入研究。首先克隆了缺失 GT-1順式反應(yīng)元件的啟動(dòng)子片段,以 GFP為報(bào)告基因,通過(guò)煙草瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行了病原菌誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)其能夠不依賴(lài)GT-1獨(dú)立響應(yīng)紋枯病菌YWK196,然
4、后又通過(guò)系列截短研究,并將鑒定的可能含有紋枯病菌響應(yīng)元件的片段分別連接35Smini基本啟動(dòng)子后進(jìn)行煙草瞬時(shí)表達(dá),發(fā)現(xiàn)存在于-513bp至-411bp的AATCA片段能夠響應(yīng)紋枯病菌,并且其驅(qū)動(dòng)的報(bào)告基因表達(dá)強(qiáng)度能夠達(dá)到全長(zhǎng)啟動(dòng)子的一半,其兩倍重復(fù)片段則能夠達(dá)到全長(zhǎng)啟動(dòng)子的表達(dá)強(qiáng)度。
綜上所述,本研究在水稻啟動(dòng)子 POS2H16中發(fā)現(xiàn)了一個(gè)新的紋枯病原誘導(dǎo)元件AATCA,對(duì)于水稻紋枯病的抗性研究提供了一定的理論依據(jù),為抗性水稻
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