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![壓力對體外培養(yǎng)RGCs的影響及燈盞細辛對壓力誘導RGCs損傷的保護作用.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/10/8/c89e5ad7-2fa7-4f75-ab47-ff82c8901597/c89e5ad7-2fa7-4f75-ab47-ff82c89015971.gif)
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文檔簡介
1、研究背景:青光眼是一組以視神經(jīng)萎縮和視野缺損為共同特征的疾病,它是僅次于白內(nèi)障的全球第二位致盲性眼病。除眼壓以外還有眾多的因素與視神經(jīng)損傷有關。燈盞細辛是一種中草藥,能夠改善微循環(huán),保護青光眼視神經(jīng)。實驗研究顯示其能夠對大鼠實驗性青光眼視神經(jīng)起保護作用,但其具體的機制仍不十分清楚。本實驗通過建立體外高壓培養(yǎng)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞模型,用燈盞細辛提取物進行保護性治療,探討其可能的作用機制。
目的:1建立體外高壓培養(yǎng)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞模型
2、并觀察壓力對視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞的影響;2觀察燈盞細辛提取物對體外培養(yǎng)鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)凋亡的影響,探討其神經(jīng)保護作用的機制,在細胞分子水平進一步為燈盞細辛提取物在眼科視網(wǎng)膜領域的保護作用提供理論依據(jù)。
方法:l建立大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞(Retinal Ganglion Cells,RGCs)體外混合培養(yǎng)模型。2在混合培養(yǎng)24小時后的神經(jīng)節(jié)細胞中加入不同濃度的燈盞細辛提取物、神經(jīng)生長因子(NGF)、培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)24小時,用噻唑蘭比
3、色法(MTT法),測定每組的光密度值(OD值)。3在視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞(RGCs)培養(yǎng)24小時后,在培養(yǎng)板中加入不同濃度燈盞細辛提取物、神經(jīng)生長因子、培養(yǎng)液,并按照實驗設計將實驗組和模型組密閉加壓至80mmHg持續(xù)4小時,繼續(xù)培養(yǎng)24小時,用Elisa法測量培養(yǎng)液中的谷氨酸和γ-氨基丁酸含量。
結果:1混合培養(yǎng)的RGCs最長可存活2-3周。2壓力能促進RGCs的凋亡。3在RGCs培養(yǎng)中,1mg/ml、0.1mg/ml濃度的燈盞細
4、辛、神經(jīng)生長因子組的OD值高于模型組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);1mg/ml燈盞細辛組OD值高于0.1mg/ml濃度的燈盞細辛和神經(jīng)生長因子組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。4在RGCs以80mmHg培養(yǎng)4h時,模型組上清液中谷氨酸含量與空白對照組相比較高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),模型組上清液中γ-氨基丁酸含量較空白對照組高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);燈盞細辛組上清液中谷氨酸含量低于模型組,差異有統(tǒng)計學意義
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