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文檔簡介
1、目的:
通過利用有關(guān)差異蛋白質(zhì)組學相關(guān)技術(shù)(雙向凝膠技術(shù)以及生物質(zhì)譜分析技術(shù))尋找出關(guān)于結(jié)腸黑變?。∕C)與結(jié)腸癌、正常患者差異表達的蛋白質(zhì)質(zhì)譜圖,應(yīng)用Mascot軟件在NCBInr數(shù)據(jù)庫檢索比對差異的蛋白質(zhì),在生物蛋白質(zhì)分子水平探討結(jié)腸黑變病與結(jié)腸癌之間的關(guān)聯(lián)及差異的蛋白質(zhì),分析與臨床意義相關(guān)聯(lián)的蛋白質(zhì)分子。
方法:
通過雙向凝膠電泳技術(shù)(2-DE)獲取MC與結(jié)腸癌及正常組織之間的差異蛋白質(zhì)凝膠圖,結(jié)合軟
2、件分析和手工篩選,查找凝膠圖中表達差異大于1.5倍的蛋白質(zhì)斑點,選出的差異點后通過酶解及生物質(zhì)譜分析(MALDI-TOF/TOF-MS)獲取相關(guān)的差異蛋白質(zhì)信息并進行分析,了解其功能及產(chǎn)生差異機制。
結(jié)果:
根據(jù)MC與正常結(jié)腸黏膜、結(jié)腸癌的二維凝膠掃描顯示圖像分析獲得的蛋白質(zhì)斑點數(shù)量為1970±138,2028±176、2150±240,應(yīng)用imagemaster7.0軟件進行圖像對比分析后,總共找到倍比大于1.5倍
3、的蛋白質(zhì)斑點14個。結(jié)腸黑變?。∕C)和正常結(jié)腸組織相比較表達的量的差異大于1.5倍的點有6個,其中在結(jié)腸黑變病黏膜組織中表達上調(diào)的差異點有2個,表達下調(diào)的差異點有4個,僅在結(jié)腸黑變病黏膜組織中表達的差異點有1個(P<0.05);結(jié)腸黑變病黏膜組織與結(jié)腸癌黏膜組織對比表達的量的差異大于1.5倍的點有8個,其中在結(jié)腸黑變病黏膜組織中表達上調(diào)的差異點有1個,在結(jié)腸癌黏膜組織中表達上調(diào)的差異點有7個。僅在結(jié)腸癌黏膜組織中表達的蛋白質(zhì)點有2個(
4、P<0.05)。質(zhì)譜分析和數(shù)據(jù)庫檢索共鑒定出8種蛋白質(zhì),包括KRT8/18、FGB fibrinogen、CAT Catalase、PSMC626S protease、TPM4等。
結(jié)論:
生物質(zhì)譜分析(MALDI-TOF/TOF-MS)很好地顯示MC組織與結(jié)腸癌組織以及正常結(jié)腸組織間的蛋白質(zhì)表達差異,為MC、結(jié)腸癌的研究提供新思路、新線索。本研究最終所鑒定出的8種不同表達的蛋白質(zhì),這些蛋白的不同表達表明可能參與結(jié)腸
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