1、目的：
　　構(gòu)建肺腺癌細(xì)胞放射抗拒株模型；慢病毒介導(dǎo)shRNA靶向沉默抗拒株細(xì)胞中HIF-1α的表達(dá)，探討其對(duì)β-catenin的調(diào)控及對(duì)肺腺癌細(xì)胞放射敏感性的影響。
　　方法：
　　采用亞致死劑量法誘導(dǎo)人肺腺癌H1299及A549放射抗拒細(xì)胞H1299R及A549R，克隆形成實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證放射抗性，CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)增細(xì)胞殖能力變化，qRT-PCR及Western Blot檢測(cè)HIF-1α、β-catenin、Cyclin

2、 D1、Survivin的基因及蛋白表達(dá)差異；通過(guò)RNAi技術(shù)，設(shè)計(jì)靶向沉默HIF-1α的shRNA，構(gòu)建慢病毒表達(dá)載體；慢病毒轉(zhuǎn)染H1299R、A549R細(xì)胞，通過(guò)克隆形成實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證放射抗拒性的變化，Western Blot檢測(cè)下調(diào)組及對(duì)照組細(xì)胞HIF-1α、β-catenin、Cyclin D1、Survivin的蛋白表達(dá)變化。
　　結(jié)果：
　　克隆形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：抗拒株細(xì)胞比親本株細(xì)胞具有更高的克隆形成率（P＜0.05

3、），H1299R細(xì)胞SF2值是H1299細(xì)胞的1.56倍，A549R細(xì)胞SF2值是A549細(xì)胞的1.55倍，抗拒株細(xì)胞放療抗性增強(qiáng)；CCK-8結(jié)果提示：在接受4Gy射線干預(yù)后親本株細(xì)胞增殖能力顯著抑制（P＜0.05）；qRT-PCR及Western Blot結(jié)果顯示：抗拒株細(xì)胞比親本株細(xì)胞中HIF-1α、β-catenin、Cyclin D1、Survivin的基因及蛋白表達(dá)水平明顯升高（P＜0.05）；通過(guò)慢病毒介導(dǎo)shRNA下調(diào)抗拒

4、株細(xì)胞HIF-1α后，下調(diào)組細(xì)胞β-catenin、Cyclin D1、Survivin蛋白表達(dá)明顯下降（P＜0.05）；在不同劑量射線干預(yù)后，隨照射劑量增加，下調(diào)組細(xì)胞HIF-1α、β-catenin、Cyclin D1、Survivin的蛋白表達(dá)明顯低于對(duì)照組（P＜0.05）；克隆形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：下調(diào)組比對(duì)照組細(xì)胞克隆形成率明顯降低（P＜0.05），通過(guò)放射敏感性參數(shù)分析H1299R對(duì)照組細(xì)胞SF2值是下調(diào)組細(xì)胞的3.56倍，A5