蒜苗過(guò)氧化氫酶的分離純化和性質(zhì)及功能基團(tuán)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、過(guò)氧化氫酶(Catalase,CAT)又稱觸酶,是一類(lèi)普遍存在于動(dòng)植物和絕大多數(shù)需氧微生物體內(nèi)的末端氧化酶。其生理功能是催化細(xì)胞內(nèi)過(guò)氧化氫分解,防止過(guò)氧化,清除生物體內(nèi)的活性氧。與超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化物酶(POD)共同組成了生物體內(nèi)活性氧防御系統(tǒng)。它在食品加工、臨床醫(yī)療、紡織、印染、環(huán)保等行業(yè)具有十分重要的應(yīng)用價(jià)值。同時(shí)來(lái)源于植物的CAT市場(chǎng)上很少,而且植物材料含有相對(duì)較少的雜蛋白,因此研究開(kāi)發(fā)取材簡(jiǎn)便、價(jià)格低廉、活性較高而

2、且性質(zhì)穩(wěn)定的植物CAT有著十分重要的意義。
   蒜苗,又叫蒜毫、青蒜,是大蒜幼苗發(fā)育到一定時(shí)期的青苗,是一種四季生長(zhǎng)又廉價(jià)易得的綠色蔬菜。它含有豐富的VC、以及可溶性蛋白質(zhì)、游離氨基酸、多糖、大蒜素等營(yíng)養(yǎng)成分并能增進(jìn)食欲,具殺菌作用。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn),蒜苗中過(guò)氧化氫酶含量較一般植物中高,在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中較穩(wěn)定且從蒜苗中分離純化過(guò)氧化氫酶未見(jiàn)報(bào)道,故本研究以新鮮的蒜苗為實(shí)驗(yàn)材料,從中分離純化CAT并對(duì)其部分性質(zhì)進(jìn)行研究,以期為進(jìn)一步的開(kāi)發(fā)

3、應(yīng)用該酶提供參考依據(jù)。研究結(jié)果如下:
   1.蒜苗過(guò)氧化氫酶的分離純化
   新鮮蒜苗經(jīng)勻漿、緩沖液抽提、硫酸銨分級(jí)沉淀、DEAE-Sepharose離子交換層析、Superdex-200凝膠過(guò)濾層析,獲得電泳純的過(guò)氧化氫酶。該酶比活力達(dá)到25975.36U/mg,回收率為40.05%,純化倍數(shù)為125.97。
   2.蒜苗過(guò)氧化氫酶的酶學(xué)性質(zhì)
   研究結(jié)果表明,蒜苗過(guò)氧化物酶的全分子質(zhì)量和亞基分子

4、質(zhì)量分別為234.93kD和59.16kD,推測(cè)該酶是由四個(gè)相同亞基構(gòu)成。該酶最適反應(yīng)溫度為45℃,最適pH值為7.2。該酶在25~45℃及pH5~10的范圍內(nèi)有較好的穩(wěn)定性;在最適條件下,以過(guò)氧化氫為底物測(cè)得其Km值為38.2mmol/L。
   3.部分化學(xué)試劑對(duì)蒜苗過(guò)氧化氫酶的影響
   甲醇、乙醇、異丙醇及SDS、KSCN、Ag+、Cu2+、Mn2+、Co2+、Cd2+、Zn2+、Ca2+、Mg2+、Ba2+該酶

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