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1、山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文疏棉狀嗜熱絲孢菌Thermomyceslanuginosus超氧化物歧化酶的分離純化及性質(zhì)研究姓名:高靜申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):植物病理學(xué)指導(dǎo)教師:李多川2003.6.11山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要疋,—文超載他物歧能酶(SuperoxideDismutase,簡(jiǎn)稱SOD)(EC11511)系~類衾瘸酶,廣泛存在予生物體孛。它能夠催毒乏超鬣弱離予(Oh發(fā)生歧化反應(yīng),從而清除怒氧陰離子。在警物體防御氧純矮傷的避程
2、中,發(fā)撂著重贅佟翅。校撂酶分子孛鼴食金震輔基熬苓弱,超戴純耪鼗鍵酶主鼗可分為CuZnSOD(存在于真核生物),MnSOD(存程予暴梭生物窩糞45“(2~50“C懿褰滾下攫好瓣繁蓬壘長(zhǎng)。磷絕大多數(shù)茨真核耋l三魏囂長(zhǎng)羯暴繕予40℃奠上將無(wú)法存活。在嗜熱藩領(lǐng)域,對(duì)超葷e純耪竣稼酶靜磅究還不多,拳擎裂是在驤穆?tīng)钹烊锝z獠蓬塑纜驗(yàn)登型黧堡塑醴燮塑等噻熱真熬上,糖漿磷究還來(lái)覓掇遵。X/\本文瓣驤穗狀嗜燕絲凝菌獺搿能刪蚪豁lanuginosus產(chǎn)生熬越
3、氧純辮歧化酶讖行了分離純化放性質(zhì)磷究。粗酶液依次進(jìn)行50%和65%硫酸鍛分緩分勰瀛淀,DEAESepharose溪離予交換較鼷褥,PhenylSepharose璇求柱層析酷及SephacrylS100分子篩鼷轎后,獲得了SDS聚落烯酰黢凝獲毫泳(SDS—PAGE避榮攀一熬超氧弦秘歧純憋。在零硬究豹整個(gè)分鬻縫化過(guò)稔中,酶靜芘活力出最初靜65。3U/mg舞離至《最終靜1769。2U/mg,縫伍蟄數(shù)鴦27?!?。fj分別甩SDS聚丙烯酰胺濺膠電
4、泳(SDSPAGE)的方法和SephacrylS100凝膠遘濾篷褥豹方法,溺定窶零番囂窕舞獲器爨趣揀鞋:耪跛純酶熬分子量分剮為224kDa和891kDa。證明在本研究中所得磷的超氯純物玻億酶是一糨鑫穩(wěn)鬻嬤4個(gè)篷基爨穆或熬蛋是矮。本鹺究黲褥到豹越襞純甥歧純酶的蕊應(yīng)最遺滾度為55“C,麓的反應(yīng)最適p至值為80。露辯,該越羲傳物竣健驁逛瑟竅較好黲熱穩(wěn)遨蛙幫p聯(lián)篷穩(wěn)定性。褒pH璧必80熬蘩率下,浚酶在50“C察604C瞳是鏊本穩(wěn)定豁,在60X2
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