1、近年來，惡性腫瘤發(fā)病率日益增加，嚴重威脅著人類健康，其中肺癌是全球發(fā)病率和致死率最高的腫瘤。雖然目前對肺癌的診斷和治療取得了一定進展，但仍存在缺少特異性診斷標記和治療靶點等問題，故開發(fā)和鑒定有效的生物標記物和治療靶點仍是臨床診治肺癌，甚至其他惡性實體腫瘤亟待解決的難題。
　　PPA1系無機焦磷酸酶（Inorganic Pyrophosphatase，PPase)家族成員之一，它在Mg2+等金屬離子結合下，參與了糖類、核酸和蛋白質等

2、合成代謝途徑中所形成的焦磷酸的水解，催化焦磷酸鹽變?yōu)檎姿猁}，釋放能量，是能量供體和ATP替代物，在細胞生長和發(fā)育的穩(wěn)定期調控細胞存活和對應激的反應。目前有關PPA1在腫瘤中的作用機制報道不多，它在腫瘤中的作用可能與腫瘤細胞在機體內快速增長，對能量的需求增加，以及對細胞的生長和發(fā)育調控有關。
　　在本文中，為了進一步了解PPA1在實體腫瘤中的表達情況及其調控機制，我們首先利用免疫組化法檢測了PPA1在12種惡性實體腫瘤組織（共67

3、5例）及癌旁組織（共305例）中的表達，結果顯示PPA1在肺癌和卵巢癌組織中呈高表達。進而用 Real-Time PCR和Western-Blot方法檢測了16株肺癌、卵巢癌、肝癌和乳腺癌的腫瘤細胞株，證實PPA1在肺癌和卵巢癌中均有較高的差異性表達。通過分析PPA1與這兩種腫瘤臨床病理參數(shù)的相關性以及在肺癌細胞NCI-H460、A549和卵巢細胞ES2、OVCAR3中沉默PPA1的體外功能實驗，我們發(fā)現(xiàn)在肺癌、卵巢癌中PPA1具有促增

4、殖和抑凋亡的潛在作用，能夠調控TP53和P21的表達。接下來，我們在差異性較高的肺癌細胞中進行了進一步的功能和機制的研究，分別選用了TP53野生型的NCI-H460、A549和TP53突變的H1299細胞，構建沉默PPA1、過表達野生型PPA1、過表達D117位點突變PPA1及相應對照的穩(wěn)定細胞系，結果顯示在不同處理組的細胞中，NCI-H460、A549過表達PPA1組的肺癌細胞凋亡減少、增殖增加，而TP53突變的NCI-H1299在沉

5、默和過表達PPA1后細胞凋亡和增殖均無明顯變化，提示TP53參與了PPA1對肺癌的增殖凋亡調控作用。同時，我們還發(fā)現(xiàn) PPA1 D117A功能位點突變在NCI-H460、A549中未能完全阻斷PPA1的作用，這可能與底物與酶結合的競爭性抑制有關。由于在NCI-H460細胞中沉默PPA1后P-JNK上調，所以我們選擇了在NCI-H460沉默PPA1組及其對照組中加入了JNK通路的特異性抑制劑JNK420119，通過凋亡和增殖相關實驗發(fā)現(xiàn)J

6、NK420119可以特異性阻斷PPA1沉默所誘導的細胞凋亡和增殖的變化。此外，我們還利用生物信息方法驗證了PPA1在肺癌、卵巢癌中高表達，而且與TP53具有相關性這一結論。
　　綜上所述，我們的研究結果顯示PPA1在多種惡性實體腫瘤中表達上調，尤其在肺癌中的表達差異性最大。在分子水平上，PPA1通過磷酸化JNK激活TP53，從而發(fā)揮抑凋亡和促增殖的作用。本研究為揭示PPA1在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用機制，及其作為新的腫瘤檢測標志物和治