日本沼蝦蛻皮抑制激素單克隆抗體的制備.pdf_第1頁(yè)
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1、日本沼蝦蛻皮抑制激素（molt-inhibiting hormone，MIH）屬于甲殼動(dòng)物高血糖激素（crustacean hyperglycemic hormone，CHH）家族神經(jīng)肽，可抑制甲殼動(dòng)物蛻皮。除MIH外，CHH家族神經(jīng)肽還包括高血糖激素、性腺抑制激素(Gonad-inhibiting hormone，GIH)和大顎器抑制激素（mandibular organ inhibiting hormone，MOIH），這些激素通常

2、由70~78個(gè)序列相似的氨基酸殘基組成。
　　本實(shí)驗(yàn)中，日本沼蝦MIH重組蛋白在原核表達(dá)菌株中高效表達(dá)，且表達(dá)產(chǎn)物以包涵體形式存在，對(duì)包涵體進(jìn)行變性、復(fù)性及純化處理。使用純化后的重組蛋白，免疫BALB/C小鼠，ELISA結(jié)果表明抗血清效價(jià)高，可用于細(xì)胞融合。取小鼠脾臟細(xì)胞，利用PEG4000作用與小鼠SP2/0細(xì)胞融合，制備雜交瘤細(xì)胞。
　　融合后，在所有出現(xiàn)雜交瘤細(xì)胞的孔中檢測(cè)到18孔強(qiáng)陽(yáng)性孔，經(jīng)過(guò)亞克隆篩選出1株能穩(wěn)定分

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