葛根總黃酮誘導急性髓細胞白血病細胞株HL-60細胞分化的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、【背景與目的】
   葛根是南京中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院血液科原創(chuàng)制劑“血復康”的主要成分之一。課題組先期的研究已經證實葛根主要有效活性成分葛根總黃酮(Puerariaeradixflavones,PRF)在50μg/ml~200μg/ml的濃度范圍內對NB4、Kasumi-1、HL-60、U937四種急性白血病細胞株有選擇性增殖抑制作用。對于HL-60細胞觀察到較低濃度葛根總黃酮(50μg/ml)可能促進急性髓系白血病(acut

2、emyeloidleukemia,AML)細胞株HL-60細胞的增殖,較高濃度(200μg/ml)葛根總黃酮則誘導HL-60細胞凋亡。本研究擬以≤50μg/mlPRF處理HL-60細胞株,探討該濃度的PRF對HL-60細胞可能的分化作用。
   【方法】
   1)10~100μg/mlPRF處理HL-60細胞24、48及72小時,MTT法檢測HL-60細胞的增殖抑制率,篩選PRF最佳工作濃度。
   2)10、

3、30、50μg/mlPRF處理HL-60細胞48小時,瑞氏染色法觀察細胞形態(tài)學改變,檢測細胞NBT積分。
   3)10、30、50μg/mlPRF處理HL-60細胞48小時,流式細胞術檢測細胞表面分化抗原CD11b、CD14、CD15、CD13及CD33;流式細胞術檢測細胞周期進程。
   【結果】
   10、30、50μg/mlPRF可抑制HL-60細胞的增殖:瑞氏染色法表明:HL-60細胞經過PRF處理后

4、,部分細胞形態(tài)出現(xiàn)分化特征;細胞周期檢測發(fā)現(xiàn):PRF使細胞G0-G1期比例增加,S期比例減少,影響細胞周期進程;流式細胞術檢測細胞表面分化抗原發(fā)現(xiàn):PRF處理后的HL-60細胞表面分化抗原CD11b、CD15表達增加,CD14低表達,CD33表達下降,CD13表達無明顯變化;NBT實驗顯示:藥物作用后的細胞中出現(xiàn)藍紫色顆粒,NBT積分隨藥物濃度增加而升高。
   【結論】
   較低濃度PRF(10、30、50μg/ml

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