1、目的：探討東亞鉗蝎毒(BMK)在體外誘導(dǎo)急性早幼粒白血病細(xì)胞株HL-60凋亡進(jìn)而抑制其生長的作用及其抗腫瘤的分子機(jī)制。 方法：應(yīng)用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)比色法觀察不同濃度BMK對(duì)HL-60細(xì)胞生長的影響；應(yīng)用流式細(xì)胞儀通過Annexin V/PI雙染色檢測細(xì)胞凋亡率；通過caspase-3 staining kit流式細(xì)胞術(shù)檢測凋亡相關(guān)蛋白caspase-3的活化表達(dá)，以及反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)顯示野生型p53基因的表達(dá)水平。

2、 結(jié)果： (1)MTT顯示經(jīng)不同濃度BMK作用于細(xì)胞48h后，能夠明顯抑制HL-60細(xì)胞的生長，且其作用在一定范圍內(nèi)呈對(duì)濃度依賴性；其IC50約為139.67mg/L。 (2)流式細(xì)胞術(shù)分析顯示BMK(100μg/ml和200μg/ml)作用于細(xì)胞24h后，細(xì)胞的總凋亡率均有升高，BMK200μg/ml可以使HL-60細(xì)胞凋亡率提高到26.53％，與對(duì)照組相比(凋亡率為6.89％)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著意義(p<0.01

3、)。 (3)流式細(xì)胞儀分析顯示BMK處理后細(xì)胞的caspase-3活化表達(dá)增高，主峰右移，caspase-3陽性的細(xì)胞數(shù)由(2.82±0.90)％增至(7.59±1.46)％，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著意義(P<0.01)。 (4)反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)未見有特異性條帶的出現(xiàn)，說明其誘導(dǎo)凋亡途徑是p53非依賴性凋亡。 結(jié)論： (1)東亞鉗蝎毒(BMK)對(duì)急性早幼粒白血病細(xì)胞株HL-60有一定的細(xì)胞毒作用