桑天牛、云斑白條天牛、星天牛雄性附腺內(nèi)容物研究.pdf_第1頁(yè)
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1、桑天牛、云斑白條天牛、星天牛均屬鞘翅目天牛科溝脛天牛亞科,為我國(guó)常見(jiàn)的林業(yè)害蟲(chóng)。天牛整個(gè)幼蟲(chóng)期都在樹(shù)干內(nèi)蛀食,羽化出孔后成蟲(chóng)在補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)階段啃食枝皮。雄性附腺是雄性生殖系統(tǒng)的重要器官,其內(nèi)容物具有激活、營(yíng)養(yǎng)及促進(jìn)精子貯存的作用,還能促進(jìn)卵巢發(fā)育,刺激雌蟲(chóng)產(chǎn)卵和調(diào)節(jié)性行為等交配效應(yīng)。研究雄性附腺內(nèi)容物成分,并在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步研究?jī)?nèi)容物生理功能,可探索通過(guò)控制生殖防治天牛的新途徑。 本研究以桑天牛、云斑天牛、星天牛雄性附腺為對(duì)象,包括

2、三方面研究?jī)?nèi)容:(1)桑天牛、云斑白條天牛、星天牛三種天牛雄性?xún)?nèi)生殖系統(tǒng)結(jié)構(gòu)比較;(2)雄性附腺內(nèi)容物主要組成成分分析;(3)雄性附腺內(nèi)容物各成分的生理功能。主要結(jié)果如下: 1、桑天牛、云斑白條天牛、星天牛雄性?xún)?nèi)生殖系統(tǒng)結(jié)構(gòu)大體相同,均由精巢(睪丸)、輸精管、貯精囊、射精管、附腺等器官組成,左右對(duì)稱(chēng)。但在精巢數(shù)目和雄性附腺著生部位存在種間差異。云斑白條天牛和桑天牛每側(cè)有2個(gè)大小相等的“葉”狀精巢,星天牛每側(cè)含有12個(gè)“小葉”狀精

3、巢。云斑白條天牛、星天牛雄性附腺與貯精囊共同匯入射精管,而桑天牛雄性附腺開(kāi)口于貯精囊中部。 2、三種天牛雄性附腺內(nèi)容物中均含有可溶性蛋白、總糖等組分,且大、小附腺管內(nèi)各組分含量不同。比較三種天牛雄性附腺內(nèi)容物中蛋白和總糖含量,桑天牛附腺內(nèi)兩種物質(zhì)含量最高,星天牛次之,云斑白條天牛最低。桑天牛雄性附腺內(nèi)容物各主要組分含量依次為:可溶性蛋白>總糖>海藻糖>游離氨基酸。交配后,桑天牛雄性附腺內(nèi)四類(lèi)組分含量均下降,之后可恢復(fù)到交配前水平

4、,但不同組分含量恢復(fù)時(shí)間有差異,蛋白組分在交配48h后即可恢復(fù)到交配前水平。 3、三種天牛雄性附腺蛋白經(jīng)PAGE電泳及糖蛋白染色后,蛋白譜帶具有種間差異。桑天牛大附腺管內(nèi)蛋白共分離出4組蛋白質(zhì)區(qū)帶,包括一組大分子量糖蛋白,小附腺管內(nèi)蛋白僅分離出1組大分子量糖蛋白質(zhì)區(qū)帶;經(jīng)SDS-PAGE電泳檢測(cè)后附腺蛋白同樣分為4組區(qū)帶。電泳檢測(cè)同樣證明交配后48h,桑天牛雄性附腺內(nèi)蛋白組分即可恢復(fù)。 4、用不同提取方法從桑天牛雄性附腺

5、內(nèi)容物中分離得到蛋白、糖、氨基酸粗提物。將三種粗提物及總內(nèi)容物分別注入雌蟲(chóng)腹部,測(cè)定各組分的生理功能。結(jié)果表明:總內(nèi)容物縮短雌蟲(chóng)壽命,糖粗體物刺激雌蟲(chóng)取食并延長(zhǎng)雌蟲(chóng)壽命。 5、桑天牛精子在精巢中聚集成精子束,但在貯精囊內(nèi)游離為單個(gè)精子。精子形態(tài)細(xì)長(zhǎng),長(zhǎng)79.2~94.1um,寬<3.3um,頭長(zhǎng)11.6~17.2um。選用Grace’s昆蟲(chóng)培養(yǎng)液和M199培養(yǎng)液體外培養(yǎng)精子,均能使精子存活到6h。將雄性附腺總內(nèi)容物與精子共培養(yǎng)后

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