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文檔簡介
1、環(huán)境滲透壓的變化對于酵母細(xì)胞的生存有著十分重要的影響。當(dāng)酵母菌處于高滲透壓環(huán)境中的時候,酵母菌的生存將受到極大的威脅。在這個時候酵母菌可以通過增加胞內(nèi)甘油的積累水平來減小細(xì)胞膜內(nèi)外的滲透壓差以實現(xiàn)對高滲脅迫的適應(yīng)。GPD1是一個由391個氨基酸組成的蛋白質(zhì),它能催化磷酸二羥丙酮生成3-磷酸甘油,在酵母細(xì)胞適應(yīng)高滲透壓脅迫的過程中起著重要的作用。高滲脅迫下GPD1的表達(dá)量和它的酶活力都將會有一定程度的上升,而且gpd1基因的突變會直接導(dǎo)致
2、酵母細(xì)胞無法在高滲環(huán)境中生長。 本研究選取生產(chǎn)中常用的酵母菌株YY、FHS和WFB,通過實驗分析造成三種酵母菌株抗高滲能力差異的原因。首先分別用濃度為1%、3%、5%的NaCl對酵母菌株YY、FHS和WFB進(jìn)行處理比較高滲脅迫對這三個菌株生長速度的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn):在NaCl的濃度為1%和3%時,NaCl對FHS菌株生長速度的影響明顯小于YY和WFB菌株;另外,在NaCl的濃度為1%時,NaCl對YY菌株生長速度的影響明顯小于W
3、FB菌株;當(dāng)NaCl的濃度為5%時,NaCl對這三個菌株生長速度影響的強(qiáng)弱依次為WFB、FHS、YY,但差距并不明顯。由此可以看出,F(xiàn)HS菌株耐高滲能力最強(qiáng)、YY菌株次之、WFB菌株最差。 分別克隆酵母菌株YY、FHS和WFB的gpd1基因片段并測序,分析這三個酵母菌株gpd1基因序列的差異。用生物學(xué)軟件VectorNTI將YY、FHS和WFBgpd1基因序列與國際基因庫(GeneBank)中的gpd1序列(X76859)進(jìn)行
4、對比,發(fā)現(xiàn)其同源性分別為99.32%、99.83%、99.83%。將這些DNA序列轉(zhuǎn)化為氨基酸序列,再用VectorNTI比對這些氨基酸序列,結(jié)果發(fā)現(xiàn)受檢菌株YY、FHSgpd1基因序列對應(yīng)的氨基酸序列與GeneBank中g(shù)pd1序列(X76859)對應(yīng)的氨基酸序列完全一致,而WFB與它們的同源性只有98.5%。 分別用濃度為1%、3%、5%的NaCl對酵母菌株YY、FHS和WFB進(jìn)行處理,比較高滲脅迫對這三個菌株gpd1基因
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