1、湖南師范大學(xué)碩士學(xué)位論文AcSDKP對(duì)體外培養(yǎng)條件下小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生長(zhǎng)的影響姓名：李燁申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生理學(xué)指導(dǎo)教師：汪保和20040401摘要N一乙酰一絲一天冬一賴一脯氨酸(AcSDKP)是一種生理性調(diào)節(jié)因子，它抑制造血干／祖細(xì)胞和其它細(xì)胞的增殖。該小分子肽能阻止細(xì)胞進(jìn)入S期，使之滯留在G。／G1期。這種抑制作用是完全可逆和非毒性的。骨髓闖充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)被認(rèn)為是骨和骨髓內(nèi)幾種細(xì)胞譜系的共同前體細(xì)胞，這些譜系包括成骨

2、細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和造血支持基質(zhì)。骨髓Msc本身也參與了造血微環(huán)境的組成及功能。本文的工作假說(shuō)是AcSDKP對(duì)MSc的生長(zhǎng)可能有調(diào)節(jié)作用。我們進(jìn)行體外細(xì)胞克隆試驗(yàn)和采用有關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)，研究了AcSD時(shí)對(duì)小鼠骨髓MSC生長(zhǎng)的影Ⅱ向。本研究所獲結(jié)果為我們的假說(shuō)提供了支持。體外培養(yǎng)條件下，AcSDKP使小鼠骨髓MSC集落的生成數(shù)和大小顯著減??；最大效應(yīng)濃度為lxl0_12mol／L，無(wú)論其濃度下降或上升，效應(yīng)都減低；在濃度Nlxl0叫om

3、ol／L干1]1x10“4mol／L時(shí)，抑制效應(yīng)明顯減弱或消失：量效關(guān)系曲線是雙相的。四甲基偶氮唑鹽法(MTT法)的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)一步證明了AcSDKP能劑量依賴性地抑制小鼠骨髓MSC的生長(zhǎng)。AcSDKP在同樣的MSC培養(yǎng)體系中作用72h被撤除后，MSC集落數(shù)明顯恢復(fù)，隨著AcSDKP的作用時(shí)間縮短而MSC集落數(shù)恢復(fù)程度增加，說(shuō)明AcSDKP對(duì)MSC生長(zhǎng)的抑制作用是可逆的。然而，即使作用時(shí)間縮短至12h集落數(shù)仍明顯少于不加AcSDKP對(duì)照組

4、，意味著該四肽因子可能對(duì)MSC的貼壁能力有抑制作用。在血清濃度為10％～30％的培養(yǎng)條件下，AcSDKP顯著減少M(fèi)SC集落生成數(shù)，但血清濃度為40％時(shí)沒(méi)有這樣的效應(yīng)，這提示AcsDKP能阻斷血清所含細(xì)胞生長(zhǎng)刺激因子的作用，而抑帛OMSC集落的生成?？傊狙芯渴状潍@得AcSDKP在體外培養(yǎng)條件下抑制骨髓MSC生長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，并且這種抑制效應(yīng)具有雙相的劑量依賴性、時(shí)間依賴性以及可逆性。AcSDKP阻斷細(xì)胞生長(zhǎng)刺激因子的作用可能是其抑制骨髓