1、目的：探討及研究不同糖濃度下對NOD鼠胰島β細(xì)胞株NIT-1的損傷作用及羅格列酮對該細(xì)胞的保護(hù)作用。研究在不同濃度葡萄糖條件下，對β細(xì)胞內(nèi)馬鈴薯球蛋白(tuberin)表達(dá)的影響，探討馬鈴薯球蛋白tuberin對胰島β細(xì)胞生長、功能的影響。
　　 方法：將NIT-1細(xì)胞按5×104個(gè)細(xì)胞/孔置于24孔培養(yǎng)板，培養(yǎng)48小時(shí)后，隨機(jī)分入各處理組5.6組(含葡萄糖5.6mmol/L)、7.8組(7.8mmol/L)、11.1組(11.

2、1 mmol/L)、16.7組(16.7mmol/L)、22.2組(22.2mmol/L)及27.6組(27.6mmol/L)再培養(yǎng)24小時(shí)，分別施與羅格列酮干預(yù)48h，應(yīng)用拉曼光譜技術(shù)檢測不同糖濃度和各組經(jīng)羅格列酮干預(yù)后48小時(shí)的單個(gè)細(xì)胞變化，應(yīng)用蛋白免疫印跡方法(Westen Blot)檢測不同糖濃度組和各組藥物干預(yù)后48小時(shí)的馬鈴薯球蛋白tuberin的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 (1)高糖組16.7mmol/L組

3、和22.5mmol/LNIT-1細(xì)胞在培養(yǎng)至120小時(shí)后與11.1mmol/L組的拉曼光譜比較與核酸和蛋白的相關(guān)的峰值有降低其中788 cm-1，1002 cm-1，1085 cm-1，1450cm-1和1650 cm-1峰值下降明顯，且隨糖濃度的增加峰值下降幅度越大。
　　 (2)當(dāng)加入10-5mol/l羅格列酮干預(yù)后與對照組拉曼光譜比較，16.7組和22.5組與11.1mmol/L對照組比較788 cm-1，1002 cm-

4、1，1085cm-1，1450cm-1和1650 cm-1峰值亦有下降變化，且22.5加藥組下降幅度大于16.7加藥組。在同一糖濃度下，加藥組上述峰值均大于未加藥組，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 (3)當(dāng)葡萄糖濃度在5.6mmol/L時(shí)，tuberin蛋白表達(dá)含量最低，而隨著葡萄糖濃度的不斷升高，TSC2轉(zhuǎn)錄水平也呈不斷增加狀態(tài)，tuberin蛋白表達(dá)5.6mmo1/L組顯著低于其他各組(P＜0.05)；27.6mmol/L組與22

5、.5mmol/L顯著高于5.6mmol/L組、11.1mmol/L及16.7mmol/L組(P＜0.05)。(4)在10-5mol/l的羅格列酮干預(yù)后，各葡萄糖組所表達(dá)tuberin較未干預(yù)組相比趨勢不變，仍是5.6組＜11.1組＜16.7組＜22.5組＜27.6組，27.6mmol/L組顯著高于其他各組(P＜0.05)，同一糖濃度下，未予羅格列酮干預(yù)組tuberin蛋白的表達(dá)均高于羅格列酮干預(yù)組(組間比較P均＜0.05)。