1、第一部分葉酸受體靶向高分子相變超聲造影劑的制備及其特性研究
　　目的：制備一種攜葉酸的高分子相變型超聲造影劑，評價其理化特性、表面葉酸連接情況及體外超聲顯影效果
　　方法：采用單乳化法制備包裹液態(tài)氟碳的高分子納米微球，再通過碳二亞胺法連接葉酸配體制備葉酸受體靶向的相變型超聲造影劑。檢測其形態(tài)、粒徑、表面電位等物理性質，并通過免疫熒光法及流式細胞術觀察造影劑表面葉酸連接情況。考察造影劑體外超聲顯影效果，并以高強度聚焦超聲(HI

2、FU)體外輻照造影劑溶液，觀察造影劑經(jīng)HIFU輻照后增強超聲顯影的特性，以DFY型定量儀進行定量和統(tǒng)計學分析。
　　結果：通過單乳化法及碳二亞胺法成功制備出葉酸受體靶向包裹液態(tài)氟碳的高分子造影劑，外觀呈乳白色混懸液，光鏡及掃描電鏡下觀察造影劑形態(tài)規(guī)則，大小均一，呈球形，平均粒徑為(244.43±13.32) nm，平均Zeta電位為（-3.75±0.97）mV。免疫熒光檢測結果顯示靶向造影劑能夠與熒光二抗特異性結合，結合率高達98

3、.49％。靶向造影劑溶液具有體外增強超聲顯影的能力，但諧波顯影效果較差，經(jīng)一定功率HIFU輻照后其超聲顯影效果較輻照前明顯增強。
　　結論：通過一種化學連接方法成功制備出葉酸受體靶向包裹液態(tài)，氟碳的納米級超聲造影劑，造影劑表面葉酸連接率較高，并且具備經(jīng)HIFU輻照后增強超聲顯影的特性，有望成為卵巢癌靶向診療的新型分子探針。
　　第二部分葉酸受體靶向高分子相變超聲造影劑靶向性實驗研究
　　目的：制備葉酸受體靶向高分子相變

4、超聲造影劑，評價其體外細胞尋靶能力及體內腫瘤聚集效果。
　　方法：采用單乳化法及碳二亞胺法制備葉酸受體靶向高分子相變超聲造影劑。體外培養(yǎng)人卵巢癌SKOV3細胞，觀察靶向造影劑與細胞結合情況，并設置非靶向造影劑組與葉酸干預組進行對照，評價其體外尋靶能力。構建裸鼠卵巢癌皮下移植瘤模型，隨機分為兩組，分別經(jīng)尾靜脈注入經(jīng)DiI標記的葉酸受體靶向高分子相變造影劑與非靶向高分子相變造影劑，注入24 h后行活體熒光成像檢查，觀察兩組造影劑在腫瘤

5、局部的聚集效果，并應用圖像后處理軟件對圖像熒光強度進行量化分析。
　　結果：成功制備了葉酸受體靶向高分子相變超聲造影劑，體外細胞尋靶實驗顯示靶向造影劑與高表達葉酸受體的SKOV3細胞大量結合，平均連接率高達（84.32±4.25）％，遠遠高于非靶向造影劑組和游離葉酸干預組?；铙w熒光成像實驗顯示靶向造影劑注射組在去除背景熒光后，移植瘤局部呈現(xiàn)較強紅色熒光;非靶向造影劑注射組去除背景熒光后，移植瘤局部僅呈現(xiàn)微弱紅色熒光;兩組移植瘤局部