1、本文旨在研究奶牛瘤胃中玉米秸稈分解菌的篩選、鑒定，及其對(duì)奶牛瘤胃發(fā)酵和生產(chǎn)性能的影響，分為4個(gè)試驗(yàn)完成。
　　 試驗(yàn)一目標(biāo)菌株的篩選及產(chǎn)酶條件的優(yōu)化。為了從瘤胃中篩選出對(duì)玉米秸稈有高效分解作用的目的菌株，并優(yōu)化其產(chǎn)酶條件，本試驗(yàn)首先以玉米秸稈為粗飼料飼喂4頭安裝有永久瘤胃瘺管的荷斯坦奶牛20 d，促進(jìn)瘤胃中且標(biāo)菌群的生長(zhǎng)。然后取4頭奶牛的瘤胃液混合，進(jìn)行富集培養(yǎng)，使目標(biāo)菌迅速擴(kuò)繁。其次采用剛果紅平板法對(duì)產(chǎn)纖維素酶的菌株進(jìn)行初篩，

2、選取透明圈大的菌株進(jìn)行玉米秸稈搖瓶復(fù)篩，得到一株對(duì)玉米秸稈有高效分解作用的目標(biāo)菌株。通過(guò)對(duì)目標(biāo)菌的產(chǎn)酶條件的優(yōu)化，得到在38.5℃條件下，該菌株的最適產(chǎn)酶條件為接種量為8％、氮源為NH3NO3、吐溫80含量為1％。
　　 試驗(yàn)二目標(biāo)菌株的鑒定。為了確定試驗(yàn)一中所得目標(biāo)菌的菌屬，本試驗(yàn)采用PCR分子鑒定法對(duì)目標(biāo)菌進(jìn)行16rRNA基因序列檢測(cè)，得知目標(biāo)菌共有1500個(gè)堿基片段，編碼500個(gè)氨基酸，AT/CG=687/813。BLAS

3、T同源性比對(duì)結(jié)果顯示目標(biāo)菌株為產(chǎn)堿菌科，與Kerstersia菌屬的相似度為99％，與Bordetella菌屬的相似度為96％，本次命名為KB菌。
　　 試驗(yàn)三KB菌對(duì)奶牛瘤胃發(fā)酵的影響。本試驗(yàn)旨在研究KB菌對(duì)奶牛瘤胃發(fā)酵的影響，選用3頭體況良好，體重、日產(chǎn)奶量均相近，安裝有永久性瘤胃瘺管的健康泌乳中期荷斯坦奶牛，試驗(yàn)分3組，飼喂3種不同處理的日糧，即0 cfu/d（對(duì)照組）、0.7×1011 cfu/d(試驗(yàn)組1)和1.4×1

4、011 cfu/d（試驗(yàn)組2）。采用3×3拉丁方試驗(yàn)設(shè)計(jì)，試驗(yàn)分為3期，每期預(yù)試期15d，正試期3d。飼喂KB菌后，測(cè)定瘤胃內(nèi)環(huán)境指標(biāo)（pH值、原蟲(chóng)數(shù)量、細(xì)菌總數(shù)、氨態(tài)氮濃度、揮發(fā)性脂肪酸濃度、菌體蛋白濃度）。結(jié)果顯示，試驗(yàn)組瘤胃液pH值（試驗(yàn)組1:6.49;試驗(yàn)組2:6.56）、氨態(tài)氮（試驗(yàn)組1:14.11;試驗(yàn)組2:14.64）、揮發(fā)性脂肪酸(VFA)濃度(試驗(yàn)組2:101.76)、乙酸濃度(試驗(yàn)組1:67.38;試驗(yàn)組2:68.3

5、1)與對(duì)照組(pH值:6.43、氨態(tài)氮:12.89、VFA濃度:96.7、乙酸濃度:64.42）相比均顯著提高（P＜0.05），而瘤胃原蟲(chóng)數(shù)，丙酸，丁酸和乙/丙酸比例與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異（P＞0.05）。
　　 試驗(yàn)四KB菌對(duì)奶牛生產(chǎn)性能的影響。本試驗(yàn)旨在研究KB菌對(duì)奶牛生產(chǎn)性能的影響，選用18頭體況良好，胎次相同，體重、日產(chǎn)奶相近的泌乳中期荷斯坦奶牛，隨機(jī)分為3個(gè)處理組，每個(gè)處理6頭奶牛，每頭奶牛為1個(gè)重復(fù)。飼喂3種不同處理

6、的日糧，即0 cfu/（對(duì)照組）、0.7×1011cfu/d（試驗(yàn)組1）和1.4×1011cfu/d（試驗(yàn)組2），試驗(yàn)預(yù)試期10 d，正試期40 d。測(cè)定產(chǎn)奶量及乳成分。飼喂KB菌40 d后，4％標(biāo)準(zhǔn)乳產(chǎn)量與對(duì)照組(19.18kg/d)相比，試驗(yàn)組1(19.27kg/d)、試驗(yàn)組2(21.34kg/d)顯著(P＜0.05)提高。試驗(yàn)組2的乳蛋白率(3.54％)、乳脂率(3.72％)差異顯著（P＜0.05），各處理乳糖率、非脂乳固體物差異