分泌性中耳炎豚鼠模型咽鼓管粘膜內水通道蛋白1,5的表達變化及其作用機制初探.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:探究模型豚鼠在分泌性中耳炎(Otitis media with effusion,OME)自然轉歸過程中,咽鼓管黏膜上皮內AQP1、AQP5的表達變化情況,試圖從新的角度探討AQP參與調控中耳液體平衡的機制。
  方法:健康雄性豚鼠35只,采用左側咽鼓管阻塞法建立可逆性OME豚鼠模型,耳內鏡下觀察并記錄造模成功豚鼠的鼓膜形態(tài)及鼓室積液情況,將造模成功的豚鼠隨機分為“術后3d組”、“術后7d組”、“術后14d組”和“術后28d

2、組”四個實驗組,分別于術后第3天、第7天、第14天和第28天處死、采集標本。同時取5只健康雄性豚鼠的左側咽鼓管組織作為對照。蘇木素-伊紅(HE)染色觀察OME豚鼠咽鼓管黏膜的組織學形態(tài)變化,免疫組織化學染色觀察AQP1、AQP5在OME豚鼠模型咽鼓管黏膜上皮內的表達部位,蛋白免疫印跡法檢測各組中AQP1,5的表達量是否有差異。
  結果:27只實驗豚鼠造模成功,術后每三天耳內鏡下觀察并記錄鼓膜形態(tài)及鼓室積液情況,將中耳感染及死亡的

3、豚鼠排除實驗隊列,最終“術后3d組”、“術后7d組”、“術后14d組”和“術后28d組”符合實驗要求予以納入的實驗豚鼠例數(shù)為6例、5例、4例、3例。HE染色觀察到對照組的咽鼓管黏膜纖毛排列整齊,形態(tài)完整;而“術后3d組”和“術后7d組”的咽鼓管黏膜出現(xiàn)纖毛紊亂、壞死、缺失,上皮層及固有層水腫,混合性腺體病理性增生等形態(tài)學改變。隨著疾病的自動轉歸,在“術后14d組”和“術后28d組”中可以觀察到咽鼓管黏膜的纖毛形態(tài)逐漸恢復,黏膜水腫較前減

4、輕。免疫組織化學染色觀察到AQP1表達于咽鼓管黏膜下的成纖維細胞以及血管內皮細胞;AQP5表達于咽鼓管黏膜的纖毛細胞頂部以及混合性腺體。蛋白免疫印跡實驗顯示AQP1與AQP5的表達量在“術后3d組”出現(xiàn)了顯著降低,“術后7d組”維持在較低水平,而在“術后14d組”出現(xiàn)了表達上升,“術后28d組”中的表達則進一步增加。
  結論:1.AQP1和AQP5在豚鼠中耳咽鼓管黏膜內存在表達,其中AQP1表達于咽鼓管黏膜下的成纖維細胞以及血管

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