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1、目的:通過建立粉塵螨過敏性哮喘小鼠的模型以及對(duì)哮喘小鼠用粉塵螨疫苗進(jìn)行特異性免疫治療,從小鼠的肺組織病理、細(xì)胞因子兩方面反映粉塵螨疫苗治療的情況,比較不同劑量的粉塵螨疫苗治療對(duì)Foxp3+CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞表達(dá)的影響,從而尋求粉塵螨疫苗治療的最佳維持劑量。
方法:用粉塵螨提取液建立C57BL/6小鼠的過敏性哮喘模型后,將32只雌性小鼠隨機(jī)分為4組治療。生理鹽水組采用粉塵螨提取液致敏激發(fā)+生理鹽水治療;低劑量組采
2、用粉塵螨提取液致敏激發(fā)+低劑量粉塵螨提取液治療;中劑量組采用粉塵螨提取液致敏激發(fā)+中劑量粉塵螨提取液治療;高劑量組采用粉塵螨提取液致敏激發(fā)+高劑量粉塵螨提取液治療。治療完成后,采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)小鼠脾細(xì)胞中CD4+CD25+T細(xì)胞及Foxp3+CD4+CD25+Tregs的含量,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法檢測(cè)小鼠血清細(xì)胞因子IL-10、TGF-β1的水平。
結(jié)果:⑴生理鹽水組、低劑量組小鼠脾細(xì)胞中CD4+CD25+T
3、細(xì)胞與CD4+T細(xì)胞含量的比例分別為[(7.49±0.72)%、(8.87±0.33)%]與中劑量組[(18.23±0.58)%]比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),而中劑量組與高劑量組[(15.23±1.50)%]比較未見明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05);生理鹽水組、低劑量組Foxp3+CD4+CD25+Tregs與CD4+CD25+T細(xì)胞含量的比例分別為[(7.78±0.36)%、(8.71±0.46)%、]與中劑量組[(13.51±1
4、.39)%]比較顯著降低(P<0.05),而中劑量組與高劑量組[(12.12±1.44)%]比較未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。⑵生理鹽水組、低劑量組小鼠血清IL-10的水平分別為[(48.14±0.38)ng/l、(50.01±0.93)ng/l]、TGF-β1的水平分別為[(72.41±1.65)ng/l、(74.67±1.66)ng/l]均低于中劑量組的水平分別為[(65.13±0.61)ng/l、(102.43±1.77)ng/
5、1],有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),而中劑量組雖然高于高劑量組,分別為[(63.91±0.27)nga、(100.11±1.26)ng/l],但未見明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
結(jié)論:①通過成功建立粉塵螨哮喘模型及完成不同劑量粉塵螨疫苗SIT發(fā)現(xiàn),SIT可以上調(diào)哮喘小鼠Foxp3基因的表達(dá)、促進(jìn)IL-10及TGF-β1的分泌。②通過粉塵螨疫苗劑量對(duì)Foxp3+CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的數(shù)量及功能影響研究發(fā)現(xiàn),粉
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