1、【目的】
　　觀察CD4+CD25+Foxp3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)在不同比例的脂肪與膽固醇飲食導(dǎo)致的大鼠肝臟不同程度脂肪變中的變化,探討Treg在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)中的免疫調(diào)節(jié)作用。
　　【方法】
　　同周齡體重雄性SD大鼠50只,隨機(jī)分為以下五組:1、對(duì)照組(100％普通飼料)10只;2、低脂肪組(4%豬油+96%普通飼料)10只;3、高脂肪組(10%豬油+90%普通飼料)10只;4、低脂肪+膽固

2、醇組(4%豬油+2%膽固醇+94%普通飼料)10只;5、高脂肪+膽固醇組(10%豬油+2%膽固醇+88%普通飼料)10只。
　　飼養(yǎng)20周末處死各組大鼠,全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定肝功能、血脂,應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血Treg占CD4+T細(xì)胞的比例,HE染色觀察肝組織脂肪變情況,運(yùn)用RT-PCR和WesternBlot檢測(cè)肝組織Foxp3的表達(dá)。
　　【結(jié)果】
　　1、HE染色示大鼠脂肪變程度:對(duì)照組為(-),低脂肪組3只為

3、(-),7只為(+),高脂肪組6只為(+),4只為(++),低脂肪+膽固醇組和高脂肪+膽固醇組1只死亡,3只為(++)余16只均為(+++),其中11只伴炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和肝細(xì)胞點(diǎn)灶狀壞死。
　　2、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血Treg占CD4+T細(xì)胞的比例:低脂肪組顯著高于對(duì)照組(P<0.01),高脂肪組與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P>0.05),低脂肪+膽固醇組和高脂肪+膽固醇組均顯著低于對(duì)照組(P<0.01)。實(shí)驗(yàn)組中,高脂肪組顯著低于低脂肪組

4、(P<0.01),低脂肪+膽固醇組顯著低于高脂肪組(P<0.01),高脂肪+膽固醇組與低脂肪+膽固醇組比較無(wú)顯著差異(P>0.05);低脂肪+膽固醇組較低脂肪組顯著降低(P<0.01),高脂肪+膽固醇組較高脂肪組顯著降低(P<0.01)。
　　3、RT-PCR檢測(cè)肝組織Foxp3mRNA的表達(dá):低脂肪組顯著高于對(duì)照組(P<0.01),高脂肪組與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P>0.05),低脂肪+膽固醇組和高脂肪+膽固醇組均顯著低于對(duì)照組(P

5、<0.01)。實(shí)驗(yàn)組中,高脂肪組顯著低于低脂肪組(P<0.01),低脂肪+膽固醇組顯著低于高脂肪組(P<0.01),高脂肪+膽固醇組與低脂肪+膽固醇組比較無(wú)顯著差異(P>0.05);低脂肪+膽固醇組較低脂肪組顯著降低(P<0.01),高脂肪+膽固醇組較高脂肪組顯著降低(P<0.01)。
　　4、Westernblotting檢測(cè)肝組織Foxp3蛋白的表達(dá):低脂肪組顯著高于對(duì)照組(P<0.01),高脂肪組與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P>0.

6、05),低脂肪+膽固醇組和高脂肪+膽固醇組均顯著低于對(duì)照組(P<0.01)。實(shí)驗(yàn)組中,高脂肪組顯著低于低脂肪組(P<0.01),低脂肪+膽固醇組顯著低于高脂肪組(P<0.01),高脂肪+膽固醇組與低脂肪+膽固醇組比較無(wú)顯著差異(P>0.05);低脂肪+膽固醇組較低脂肪組顯著降低(P<0.01),高脂肪+膽固醇組較高脂肪組顯著降低(P<0.01)。
　　【結(jié)論】
　　1、飲食中膽固醇對(duì)NASH的發(fā)生可能具有十分重要的作用,脂肪