鹿茸補腎湯及其多肽對干細胞成骨活性的影響——以靶向調(diào)控TGF-β-Smads信號通路對脂肪間充質(zhì)干細胞的影響為例.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、鹿茸作為名貴中藥具有多種藥理活性,在疾病治療中應用廣泛。鹿茸補腎湯具有補腎陽、強筋骨等功效。其君藥鹿茸中提取的32肽對骨髓間充質(zhì)干細胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)有明顯的促增殖和誘導分化活性,而脂肪間充質(zhì)干細胞(Adipose tissue-derived stem cells, ADSCs)與MSCs均來自于胚胎中胚層,亦在骨損傷修復和抗腫瘤研究中備受關(guān)注。
  本實驗觀察鹿茸補腎湯及鹿茸32肽對小

2、鼠ADSCs和人腎上皮細胞(293T)增殖、遷移及黏附性的影響,進而研究鹿茸32肽對小鼠ADSCs向成骨細胞轉(zhuǎn)化的影響以及轉(zhuǎn)化過程中TGF-β1、ALP、Smad1、Smad2、Smad3表達量的變化。MTT實驗表明,鹿茸補腎湯凍干粉及其多肽對ADSCs促增殖作用明顯,鹿茸補腎湯凍干粉對293T促增殖作用不顯著,鹿茸多肽對293T促增殖作用明顯。細胞劃痕實驗表明,鹿茸補腎湯凍干粉作用的ADSCs及293T劃痕寬度大于對照組,鹿茸多肽濃度

3、為1ug/ml時,ADSCs及293T細胞劃痕寬度小于對照組,50ug/ml及5ug/ml時劃痕寬度大于對照組。胰蛋白酶消化實驗發(fā)現(xiàn)隨著鹿茸補腎湯凍干粉及其多肽濃度的升高,ADSCs細胞消化時間顯著縮短。礦化實驗中實驗組鈣結(jié)節(jié)數(shù)量多于對照組,并且在轉(zhuǎn)化過程中,TGF-β1、Smad2及Smad3表達量升高,Smad1及ALP表達量降低。
  本研究揭示鹿茸補腎湯凍干粉可促進ADSCs增殖,抑制其遷移,降低細胞黏附力,抑制293T增

4、殖及遷移。鹿茸多肽可促進293T增殖,促進小鼠ADSCs增殖并且降低細胞黏附力。對于兩種細胞,低濃度多肽可促進細胞遷移,高濃度則抑制。鹿茸多肽可以促進ADSCs向成骨細胞轉(zhuǎn)化,并促進轉(zhuǎn)化過程中TGF-β1、Smad2及Smad3的表達,抑制Smad1及ALP的表達。實驗表明鹿茸多肽作用效果優(yōu)于鹿茸補腎湯,可用于促進細胞增殖,降低其在特定區(qū)域的黏附,同時為促進其向受損部位轉(zhuǎn)移提供了可能。在此實驗過程中初步探討了靶向作用于TGF-β信號通路

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