1、過(guò)氧化氫酶是一種廣泛存在于生物組織中的氧化還原酶，主要生理功能是催化過(guò)氧化氫分解為水和氧氣，防止細(xì)胞過(guò)氧化，與超氧化物歧化酶、過(guò)氧化物酶和抗壞血酸過(guò)氧化物酶一起被稱為生物體系的酶防御系統(tǒng)。自由基是機(jī)體新陳代謝的產(chǎn)物，在體內(nèi)大量積累會(huì)造成機(jī)體的氧化損傷，從而引發(fā)多種疾病。抗氧化劑可以清除自由基或活性氧，在病理學(xué)和飲食中起著非常重要的作用。近年來(lái)很多實(shí)驗(yàn)轉(zhuǎn)向研究抗氧化劑間的協(xié)同作用，以尋找高效的復(fù)合抗氧化劑。本文主要在以下幾方面進(jìn)行了研究:

2、
　　 1、建立了基于鉬酸銨顯色的高效液相色譜法測(cè)定過(guò)氧化氫酶活性的方法。實(shí)驗(yàn)研究了流動(dòng)相的組成、pH、比例及流速對(duì)反應(yīng)體系分離的影響，得到的最優(yōu)的色譜條件為流動(dòng)相:甲醇-0.5％冰乙酸水溶液(pH2.9)(40:60(V/V));流速:0.5mL/min進(jìn)樣體積:20μL;檢測(cè)波長(zhǎng):405nm;柱溫:室溫。研究了酶活測(cè)定體系中催化時(shí)間、鉬酸銨加入量及鉬酸銨與過(guò)氧化氫反應(yīng)時(shí)間對(duì)產(chǎn)物生成量的影響。在最優(yōu)色譜條件下，體系中各物質(zhì)在6

3、min內(nèi)即可分離完成。產(chǎn)物峰面積和遷移時(shí)間的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為3.36％和0.03％，檢出限(S/N=3)為2.58×10-6mol/L。該法可用于過(guò)氧化氫酶活性的測(cè)定。
　　 2、在抗壞血酸/Fe2+的羥自由基產(chǎn)生體系中，以苯甲酸為羥自由基捕獲劑，建立了毛細(xì)管電泳測(cè)定過(guò)氧化氫酶對(duì)羥自由基清除率的分析方法。優(yōu)化了背景緩沖液的pH值、電解質(zhì)濃度、表面活性劑濃度及分離電壓。優(yōu)化的電泳條件為:緩沖液pH9.2，電解質(zhì)濃度為10mmol

4、/L，表面活性劑濃度為30mmol/L;分離電壓為20kV。在最優(yōu)電泳條件下，研究了羥自由基產(chǎn)生體系中各底物濃度和反應(yīng)時(shí)間對(duì)產(chǎn)物生成量的影響。所建立的方法可在15min內(nèi)實(shí)現(xiàn)體系中的各物質(zhì)的分離;產(chǎn)物間羥基苯甲酸的線性范圍是5×10-6～1×10-3mol/L，檢出限為2.8×10-7mol/L。方法可用于過(guò)氧化氫酶對(duì)羥自由基清除率的測(cè)定。
　　 3、研究了天然抗氧化劑原花青素和綠原酸獨(dú)立抗氧化作用和與過(guò)氧化氫酶的協(xié)同抗氧化作用