1、目的:
　　瞼板腺癌(meibomian gland carcinoma，MGCA)盡管屬于惡性程度很高的惡性腫瘤，卻很少出現(xiàn)在國外的文獻上，而在國人眼瞼惡性腫瘤中，其發(fā)病率僅次于基底細胞癌，位居眼瞼惡性腫瘤的第2位（約占32.7％）。且呈增長的趨勢。該腫瘤具有明顯的浸潤性和侵襲性，臨床很容易誤診，出現(xiàn)復發(fā)、轉移，并且治療上很棘手，嚴重威脅著患者的視力和生命。要降低瞼板腺癌的發(fā)病率和死亡率，必須重視其發(fā)病機制的研究以做到早期診斷。

2、除DNA核苷酸序列改變可影響腫瘤發(fā)生發(fā)展外，表觀遺傳學機制在腫瘤形成過程中的作用越來越受到重視，腫瘤中普遍存在DNA甲基化狀態(tài)的改變，表現(xiàn)為總體的甲基化水平降低與局部的甲基化水平升高，即抑癌基因與修復基因的高甲基化與反轉錄轉座子、癌基因的去甲基化，這預示著它可作為一種新的腫瘤形成敏感指標，甚至應用于腫瘤的預防和治療。
　　RASSF1A是定位在染色體3p21.3片段上的，并在2000[1]年被Dammann等研究人員發(fā)現(xiàn)的新型的R

3、as因子。它是(RASSF1A-RASSF1H)七種亞型中的一種且隸屬于RASSF1家族(Ras AssociationDomain family1)，后面相關的研究發(fā)現(xiàn)其是一個新型的抑癌基因，其失活可以誘發(fā)產(chǎn)生各類惡性腫瘤，在人類的腫瘤中，RASSFIA基因幾乎從不發(fā)生突變，啟動子甲基化在RASSFIA表達中發(fā)揮主要作用。RASSF1A被發(fā)現(xiàn)在腫瘤中是除了P16基因以外，甲基化的程度最廣泛以及最高的一種基因之一。由于對在腫瘤中RASS

4、FIA表達缺失和啟動子區(qū)高甲基化的不斷研究發(fā)現(xiàn)，其對腫瘤的發(fā)生和發(fā)展起非常重要作用。因而可認為RASSF1A基因的甲基化改變可成為早期發(fā)現(xiàn)腫瘤的關鍵候選指標之一。
　　方法:
　　1、應用免疫組織化學(immunohistochemistry) SP法檢測40例瞼板腺癌組織及相應癌旁正常組織中RASSF1A蛋白的表達情況。
　　2、應用甲基化特異性PCR(methylation specific polymerase

5、chain reaction，MSP)技術檢測40例瞼板腺癌組織及40例正常組織中RASSF1A基因的甲基化狀態(tài)。
　　3、運用統(tǒng)計軟件SPSS13.0對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。
　　結果:
　　1、RASSF1A基因甲基化狀態(tài):40例瞼板腺癌中，29例癌組織存在RASSF1A基因啟動子甲基化，甲基化頻率72.5％(29/40);40例正常瞼板腺中，6例組織存在RASSF1A基因啟動子甲基化，甲基化頻率15％(6/40)。

6、瞼板腺癌RASSF1A基因啟動子甲基化率明顯高于正常瞼板腺，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(x2=22.236，P=0.000＜0.01)。進一步分組分析發(fā)現(xiàn)，RASSF1A基因該位點甲基化率與患者年齡患者(P＞0.05）、性別(P＞0.05）、腫瘤組織TNM分期（P＞0.05）、分化程度(P＞0.05)、有無復發(fā)(P＞0.05)無相關性。
　　2、RASSF1A蛋白表達情況:40例瞼板腺癌中，11例RASSF1A蛋白表達陽性，表達率2

7、7.5％(11/40);40例正常瞼板腺RASSF1A蛋白陽性表達100％(40/40)。瞼板腺癌中RASSF1A蛋白陽性表達率明顯低于正常瞼板腺，差異有統(tǒng)計學意義（x2=30.000，P=0.000＜0.01）。進一步分組分析發(fā)現(xiàn)，RASSF1A蛋白表達與患者年齡(P＞0.05）、性別(P＞0.05）、腫瘤組織TNM分期（P＞0.05）、分化程度(P＞0.05)、有無復發(fā)(P＞0.05)無相關性。
　　結論:
　　瞼板腺癌

8、組織中，存在RASSF1A基因高甲基化及RASSF1A蛋白顯著低表達或缺失，由此可以推斷:
　　1、RASSF1A基因啟動子甲基化可能是造成該基因失活的原因，表達產(chǎn)物減少或缺失與基因甲基化密切相關。
　　2、RASSF1A基因啟動子甲基化可能是瞼板腺癌的發(fā)病機制之一，RASSF1A蛋白表達減少或缺失對瞼板腺癌的發(fā)生、發(fā)展起了重要的促生作用。
　　3、RASSF1A有望成為瞼板腺癌的分子標志物，從而為瞼板腺癌的早期診斷及