1、本文首次從斑蝥體內(nèi)提取純化得到一種活性蛋白,并對(duì)其抗血栓和抗癌作用進(jìn)行了初步的研究。采用硫酸銨鹽析法對(duì)其蛋白質(zhì)進(jìn)行提取,用DEAE-32纖維素層析柱對(duì)所分離斑蝥蛋白粗提液進(jìn)行純化,得到相對(duì)分子質(zhì)量約為95.5kD的單一組分蛋白。經(jīng)檢測,斑蝥活性蛋白具有纖溶活性,每毫克斑蝥活性蛋白相當(dāng)于14.7尿激酶國際標(biāo)準(zhǔn)活力單位,其蛋白濃度為10mg·mL-1,糖含量為11.084％。
　　 本實(shí)驗(yàn)還研究了不同理化因素對(duì)斑蝥活性蛋白的影響。該

2、活性成分在3512下最穩(wěn)定,65℃及以上活性喪失,金屬離子K+、Na+對(duì)其活力無影響,Mn2+、Ca2+對(duì)其有明顯抑制作用,1％的SDS和1％的巰基乙醇則可完全抑制其活力。最適pH為6.0～7.0。實(shí)驗(yàn)還對(duì)斑蝥活性蛋白進(jìn)行了紅外吸收檢測,結(jié)果表明,斑蝥蟲活性蛋白可能是一種含有糖結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)。
　　 實(shí)驗(yàn)還采用急性毒性實(shí)驗(yàn)對(duì)斑蝥活性蛋白的安全性進(jìn)行初步研究,結(jié)果表明斑蝥活性蛋白安全。同時(shí)對(duì)斑蝥活性蛋白的溶血性做了檢測,其溶血率小于

3、5％,不引起體外紅細(xì)胞的明顯溶血,安全性好。對(duì)斑蝥活性蛋白進(jìn)行體外溶栓實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明其具有溶栓作用,并且血凝塊的溶解率隨著斑蝥活性蛋白濃度的增加而增加。
　　 血栓與惡性腫瘤轉(zhuǎn)移關(guān)系密切。因此,本文通過斑蝥活性蛋白對(duì)乳腺癌細(xì)胞(MCF-7),肺癌細(xì)胞(A549)和小鼠腹水瘤細(xì)胞(S180)的抑制作用實(shí)驗(yàn),MTT法測定斑蝥纖溶活性蛋白對(duì)以上細(xì)胞體外增殖的影響,纖溶活性蛋白按照不同濃度分別作用于細(xì)胞24h和48h,結(jié)果顯示其中對(duì)S1