Zbtb38過表達對小鼠脊髓損傷的修復(fù)機理研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、脊髓損傷(SCI)是以脊髓受損部位以下知覺、活動機能幾乎全部喪失為表型的嚴重創(chuàng)傷,造成脊髓神經(jīng)元大量損失,造成機體修復(fù)能力與促修復(fù)因子的缺失,通常都是由于戰(zhàn)爭與交通意外引起的后果,往往伴隨著復(fù)雜生理學進程的同時也會發(fā)生相關(guān)基因表達的差異。目前還沒有使患者完全恢復(fù)的治療方法,阻止繼發(fā)性損傷的方法,促進軸突再生并最終達到改善功能的結(jié)果對脊髓損傷后的修復(fù)非常重要。為此,本實驗組前期已運用mRNA差異顯示技術(shù)從大量基因表達圖譜中篩選出SCI過程

2、中相關(guān)差異表達的基因,發(fā)現(xiàn)CIBZ蛋白在小鼠模型中經(jīng)線粒體途徑參加脊髓損傷的過程。
  本研究從小鼠組織中提取總RNA,經(jīng)反轉(zhuǎn)錄并擴增出目的基因Zbtb38,測序確認后通過四質(zhì)粒系統(tǒng)包裝成慢病毒,檢測達到活體注射所要求的滴度即可進行注射。小鼠需建立脊髓損傷模型,檢測注射后小鼠的行為學表現(xiàn)和細胞凋亡與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)基因的表達。尾靜脈注射后的斜板測試結(jié)果與運動機能評分結(jié)果顯示出相似的變化趨勢,SCI組與治療組的測試評分明顯比空白組要低

3、,并且治療組在每個時間點分組的評分都顯著比SCI組相應(yīng)時間點的分組評分高。熒光定量PCR結(jié)果顯示相比較于SCI組,治療組的Zbtb38表達量顯著增高,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激基因Chop和ERdj4表達量顯著降低,促凋亡基因Bim、Bax、Bak和Puma的表達量明顯降低,抑凋亡基因Bcl2的表達量剛好相反,明顯增高,但這種降低和增高的顯著性都是在4d和8d時表現(xiàn)出來,2d時都不明顯。由此可見,尾靜脈注射過表達Zbtb38慢病毒能夠使小鼠體內(nèi)Zbtb

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