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1、苜蓿(MedicagosativaL.)青貯是保持其青綠特性和解決苜蓿在調(diào)制干草時(shí)造所成損失的有效措施。但是苜蓿在制作青貯飼料的過(guò)程中,由于自身植物蛋白酶和微生物等因素,使大量真蛋白水解成為不利于家畜吸收的非蛋白氮(non-proteinnitrogen,NPN)大大減少了苜蓿青貯飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和利用效率。
本文對(duì)苜蓿中所含肽鏈內(nèi)切酶的種類進(jìn)行了研究,以綠汁發(fā)酵液模擬青貯發(fā)酵過(guò)程,探討了苜蓿中肽鏈內(nèi)切酶的特性及其在苜蓿青貯
2、過(guò)程中對(duì)蛋白的降解作用。在制作苜蓿綠汁發(fā)酵液前通過(guò)添加各種肽鏈內(nèi)切酶的抑制劑,并設(shè)置對(duì)照組來(lái)分析不同肽鏈內(nèi)切酶在形成非蛋白各組分過(guò)程中的作用。試驗(yàn)結(jié)果表明:
1、苜蓿中含有絲氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、金屬蛋白酶和半胱氨酸蛋白酶等四種肽鏈內(nèi)切酶;
2、完全抑制各種肽鏈內(nèi)切酶活性的抑制劑濃度分別為:絲氨酸蛋白酶---5mM的PMSF;天冬氨酸蛋白酶---0.1mM的PeptatinA;金屬蛋白酶---5mM的1
3、,10-phenantroline;半胱氨酸蛋白酶---0.1mM的E-64;且苜蓿中絲氨酸蛋白酶的最適溫度為45℃,最適pH值為6.6;
3、氨態(tài)氮(NH3-N)的形成過(guò)程中,金屬蛋白酶起到了主要作用,而半胱氨酸蛋白酶的作用甚微;金屬蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶在游離氨基酸的形成過(guò)程中起主要作用,絲氨酸蛋白酶次之;天冬氨酸蛋白酶在氨態(tài)氮和游離氨基酸的形成過(guò)程中,貢獻(xiàn)率最?。辉趯⒌鞍姿獬呻牡倪^(guò)程中,天冬氨酸蛋白酶和半胱氨酸蛋
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