極性蛋白Scrib在原腸胚發(fā)生中作用研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、在胚胎發(fā)生過程中,從原腸期開始出現(xiàn)器官的發(fā)生和分化,神經(jīng)管、體節(jié)、心臟、腦、原腸、血管等都是在這個(gè)階段產(chǎn)生的,而這一切的開端始于囊胚期上胚層的細(xì)胞向中線運(yùn)動(dòng)形成原條產(chǎn)生中胚層(也叫EMT)。卵子及隨后的發(fā)育過程中,在受精卵內(nèi)眾多因子參與到原條的細(xì)胞運(yùn)動(dòng)及后續(xù)器官發(fā)育中,而表達(dá)在上皮類細(xì)胞中的極性蛋白基因是重要的調(diào)控一族。果蠅中極性蛋白Scrib的缺失使得果蠅上皮細(xì)胞的極性缺失,細(xì)胞過度增殖;在人類中Scrib中作為腫瘤抑制基因發(fā)揮作用;

2、同時(shí)Scrib 也在神經(jīng)發(fā)育中對神經(jīng)突觸的功能的維持、內(nèi)耳的發(fā)育也起到重要的作用。在我們前期的研究中在體外已經(jīng)證實(shí)了Scrib可以和Numb 結(jié)合負(fù)調(diào)控Notch信號。這條信號通路在體內(nèi)是否有功能及有何功能,還沒有得到證實(shí)。本課題以雞胚作為動(dòng)物模型研究體內(nèi)情況下Scrib和Numb的異常表達(dá)對胚胎發(fā)育產(chǎn)生的影響及如何產(chǎn)生這種影響。
   我們通過原位雜交的方法分別檢測了Scrib、Numb的表達(dá),探索兩種基因在原腸期的表達(dá)規(guī)律,

3、發(fā)現(xiàn)Scrib表達(dá)開始于HH 4 并在原條前端表達(dá),表達(dá)集中,當(dāng)?shù)竭_(dá)HH 7時(shí)則呈彌散性表達(dá);Numb的表達(dá)在早期和Scrib 相同,但后期主要表達(dá)在神經(jīng)系統(tǒng)中。通過電轉(zhuǎn)染的方法分別過表達(dá)Scrib和Numb,發(fā)現(xiàn)過表達(dá)引起胚胎發(fā)育異常,過表達(dá)早期使得胚胎細(xì)胞遷移受阻,上胚層的細(xì)胞對中胚層的轉(zhuǎn)變受到抑制;后期過表達(dá)引起神經(jīng)管閉合緩慢,起到延緩發(fā)育的作用。
   我們用shRNA降調(diào)Scrib的表達(dá)發(fā)現(xiàn)了相反的現(xiàn)象,降調(diào)后促進(jìn)神經(jīng)

4、管的發(fā)育。
   同時(shí)也檢測與神經(jīng)管發(fā)育有關(guān)的基因Pax-7、Islet-1等等,發(fā)現(xiàn)Pax-7表達(dá)不受影響,但I(xiàn)slet-1表達(dá)受到抑制。
   綜上所述,我們的結(jié)果發(fā)現(xiàn)Numb和Scrib的過表達(dá)和降調(diào)對EMT的轉(zhuǎn)變和神經(jīng)管的發(fā)育具有相關(guān)性,這對于我們進(jìn)一步探索Scrib和Numb 結(jié)合信號的功能及下游分子機(jī)制打下牢固的基礎(chǔ)。
   結(jié)論:Scrib和numb在原腸期雞胚發(fā)育中起到重要作用,過表達(dá)Scrib和

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