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![β-環(huán)糊精樹枝分子的合成及免疫佐劑效果分析.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/11/10/6c788712-0b05-4943-ba15-142aa4f02bfe/6c788712-0b05-4943-ba15-142aa4f02bfe1.gif)
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文檔簡介
1、疫苗對傳染病、烈性疾病的治療和預(yù)防具有重要意義。新型亞單位疫苗,不含有病毒的基因組,較減毒活疫苗安全,但免疫原性很弱,需要在使用時加入一定量的疫苗佐劑,來提高免疫效果。因此本論文合成了基于β-環(huán)糊精的樹枝狀大分子,研究其作為佐劑的免疫學(xué)性質(zhì)和安全性。
首先β-環(huán)糊精(β-CD)和甲基丙烯酸酐(MA)反應(yīng),合成甲基丙烯酸酐?;摩?環(huán)糊精(β-CDMA),產(chǎn)率為70%;其次甲基丙烯酸酐和甲基丙烯酸羥乙酯反應(yīng),合成單體乙二醇二甲基
2、丙烯酸酯,產(chǎn)率為71%;以β-CDMA為樹枝狀大分子的核,通過點擊化學(xué)和邁克爾加成反應(yīng),使乙二醇二甲基丙烯酸酯單體與半胱胺交替反應(yīng),合成G1、G2、G3代樹枝狀大分子,產(chǎn)率分別為84%、80%、90%。1H NMR結(jié)果表明產(chǎn)物結(jié)構(gòu)正確;凝膠滲透色譜結(jié)果表明β-CDMA的聚合物分散性指數(shù)(polymer dispersity index,簡稱PDI)值為1.1,接近單分布,純度較高。對于G1、G2、G3代樹枝狀大分子,隨著樹枝狀大分子代數(shù)
3、的增加,分子量增加,且PDI值均小于1.1,表明合成的樹枝狀大分子接近單分布,純度較高。
以常規(guī)鋁佐劑為對照,考察不同劑量的G3樹枝狀大分子對風(fēng)疹亞單位疫苗體液免疫應(yīng)答和細胞免疫應(yīng)答的增強效果。間接ELISA實驗結(jié)果表明,隨著G3樹枝狀大分子劑量的增加,抗血清滴度增加;對同一劑量,不同血清稀釋度下G3樹枝狀大分子組和鋁佐劑組的OD值進行比較,其中當佐劑的使用劑量為100μg,血清稀釋度為1:160,1:320時,G3樹枝狀大分
4、子組的OD值比鋁佐劑組的OD值高,差異極顯著。因此表明G3樹枝狀大分子作為佐劑可以提高小鼠血清中特異性的抗體滴度,而且在G3樹枝狀大分子的免疫劑量為100μg時,體液免疫效果最好。夾心ELISA實驗結(jié)果表明,當G3樹枝狀大分子的使用劑量為100μg時,產(chǎn)生的IFN-γ、IL-2的濃度比同劑量鋁佐劑組產(chǎn)生的IFN-γ、IL-2的濃度高,差異顯著,因此表明當G3樹枝狀大分子的免疫劑量為100μg時,作為佐劑可以提高風(fēng)疹亞單位疫苗的細胞免疫應(yīng)
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