1、目的：通過比較生川烏單行及生川烏與全瓜蔞配伍水浸劑對(duì)小鼠急性毒性及對(duì)大鼠的長(zhǎng)期毒性，確定二者配伍對(duì)生川烏毒性的影響，探討中藥十八反中“烏頭反瓜蔞”藥對(duì)配伍與毒性的關(guān)系，為該藥對(duì)的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法：
　　 1.藥液制備取生川烏50g，粉碎成米粒大小顆粒，加3倍pH=5 HCl溶液，超聲混合10min，浸泡12h，過濾，藥渣再加3倍pH=5 HCl溶液，浸泡6h，過濾，合并濾液，將藥液4000轉(zhuǎn)/分離心，加

2、適量NaHCO3調(diào)pH=7.5，冷凍濃縮至50ml(1g/m1)溶液備用。另取生川烏與全瓜蔞各50g，按上述方法制備生川烏配伍全瓜蔞水浸劑。
　　 2.急性毒性試驗(yàn)以“低比稀釋法”按1:0.7比例配制一系列藥液。昆明種小鼠140只，隨機(jī)分為生川烏單行組和生川烏配伍全瓜蔞組，每組70只。每組再隨機(jī)分為(以烏頭劑量計(jì)算)28 g/kg、19.6 g/kg、13.7 g/kg、9.6 g/kg、6.7 g/kg、4.7g/kg組及空白

3、對(duì)照組，ig給藥，給藥容積40ml/kg，空白對(duì)照組ig等容積蒸餾水。給藥后觀察14d。記錄小鼠中毒潛伏期、癥狀及死亡時(shí)間、恢復(fù)期及死亡數(shù)量。用改進(jìn)寇氏公式計(jì)算LD50。
　　 3.長(zhǎng)期毒性試驗(yàn) Wistar大鼠50只，生川烏單行組(0.31g/kg)，生川烏配伍全瓜蔞1g/kg、0.3g/kg、0.1g/kg組及空白對(duì)照組，每組20只，雌雄各半。給藥容積5ml/kg體重，ig給藥，每天1次，每周給藥7d，連續(xù)給藥28d，對(duì)照組

4、給予等容積蒸餾水。各組大鼠自由飲食，每周稱體重1次。給藥期間觀察大鼠一般狀態(tài)。末次給藥后24h，以0.04％水合氯醛腹腔注射麻醉2/3大鼠，腹主動(dòng)脈取血，然后處死大鼠，取心、肝、脾、肺、腎、腦、胸腺、大腸、小腸、子宮、卵巢、睪丸、前列腺等器官，用生理鹽水沖洗濾紙吸干后稱重，計(jì)算臟器指數(shù)，備用。余1/3大鼠停藥15d后同法麻醉取材。
　　 檢測(cè)血液常規(guī)及心(CK、LDH)、肝(AST、ALT)、腎(BUN、Cr)功能等生化指標(biāo)，主

5、要組織器官進(jìn)行病理形態(tài)學(xué)檢查。
　　 結(jié)果：
　　 1.急性毒性中毒表現(xiàn)為一系列中樞神經(jīng)系統(tǒng)及軀體運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)癥狀，如惡心、嘔吐、咳嗽、運(yùn)動(dòng)麻痹等，動(dòng)物死前多出現(xiàn)數(shù)次跳躍，狂躁不安，繼之肢體抽搐、震顫、瞳孔散大、遺尿，最后死于呼吸衰竭。生川烏單行動(dòng)物中毒反應(yīng)的潛伏期為2.6-9.3min；恢復(fù)時(shí)間為43.3-250.0 min；死亡時(shí)間為8.0-29.5 min。生川烏配伍全瓜萎動(dòng)物中毒反應(yīng)的潛伏期為3

6、.40-4.60，恢復(fù)時(shí)間為54.6-1126.0 min；死亡時(shí)間為8.67-13.7min。
　　 生川烏單行LD50為9.26g/kg，95％可信限為7.70 g/kg-11.15g/kg。生川烏配伍全瓜萎LD50為7.48g/kg，95％可信限為6.40 g/kg-8.74 g/kg。生川烏單行水浸劑LD50大于生川烏配伍全瓜蔞LD50。
　　 2.長(zhǎng)期毒性
　　 2.1.一般狀態(tài)實(shí)驗(yàn)期間，各組動(dòng)物無死亡

7、，一般狀況良好。給藥組動(dòng)物體重增長(zhǎng)率與空白對(duì)照組比較差異無顯著意義(P>0.05)。
　　 2.2.毒性反應(yīng)癥狀各給藥組動(dòng)物均于給藥后5－10min出現(xiàn)不同程度的活動(dòng)減少、惡心、嘔吐、咳嗽等中毒癥狀。毒性反應(yīng)程度與給藥劑量呈正相關(guān)，毒性反應(yīng)在給藥后3－5 h內(nèi)逐漸消失。對(duì)照組動(dòng)物未出現(xiàn)上述癥狀。
　　 2.3.臟器指數(shù)肉眼觀察，大鼠臟器組織無異常變化。生川烏組及烏瓜配伍各劑量組雌性大鼠腎臟系數(shù)高于對(duì)照組(P<0.05)；

8、胸腺系數(shù)低于對(duì)照組(P<0.05)。烏瓜配伍各劑量組與生川烏組雌性大鼠臟器指數(shù)比較差異無顯著意義(P>0.05)。生川烏組及烏瓜配伍各劑量組雄性大鼠的各臟器系數(shù)與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，烏瓜各劑量組與生川烏組雄性大鼠各臟器指數(shù)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。停藥15d，生川烏組及烏瓜配伍各劑量組大鼠臟器系數(shù)與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 2.4.血液常規(guī)生川烏組及烏瓜配伍各劑量組雌

9、性大鼠的紅細(xì)胞數(shù)(RBC)高于對(duì)照組(P<0.05)。生川烏組與烏瓜配伍各劑量組雌性大鼠的血液學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。生川烏組及烏瓜配伍各劑量組雄性大鼠的血液學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，生川烏組與烏瓜配伍各劑量組雄性大鼠的血液學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。停藥15d，生川烏組及烏瓜配伍各劑量組大鼠血液學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

10、　　 2.5.血液生化學(xué)指標(biāo)生川烏組大鼠(雌雄)血清AST、ALT及BUN水平高于對(duì)照組(P<0.05)。
　　 烏瓜配伍高劑量組大鼠(雌雄)血清AST、ALT、BUN、Cr、CK及LDH水平高于對(duì)照組(P<0.05－0.01)；中劑量組雌性大鼠血清AST、ALT、LDH水平高于對(duì)照組(P<0.05)，雄性大鼠血清AST、ALT、BUN水平高于對(duì)照組(P<0.05)；低劑量組雄性大鼠血清AST、ALT及BUN水平高于對(duì)照組(氏

11、P<0.05)。
　　 烏瓜配伍高劑量組雌性大鼠BUN、Cr、CK水平高于生川烏組(P<0.05)。烏瓜配伍各劑量組雄性大鼠各項(xiàng)指標(biāo)與生川烏組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 停藥15d，烏瓜配伍高劑量組大鼠血清AST、ALT水平高于對(duì)照組(P<0.05)，烏瓜配伍高劑量組其他血清生化指標(biāo)與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，生川烏組及烏瓜配伍中、低劑量組其他血清生化指標(biāo)與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

12、P>0.05)。
　　 2.6.病理組織學(xué)烏瓜配伍高劑量組大鼠心、肝、腎等組織細(xì)胞出現(xiàn)細(xì)胞壞死、水腫及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)等病理改變。烏頭組及烏瓜配伍中、低劑量組大鼠主要臟器組織損傷較輕或無明顯損傷。停藥15d各劑量組大鼠主要臟器組織無明顯損傷。
　　 結(jié)論：
　　 1.生川烏配伍全瓜蔞急性毒性強(qiáng)于生川烏單行。
　　 2.生川烏配伍全瓜蔞水浸劑長(zhǎng)期給藥對(duì)大鼠心、肝、腎功能及組織學(xué)均有一定毒性，對(duì)大鼠體重增長(zhǎng)率及血