趨化因子MIP-1α、MIP-1β、MCP-1在自身免疫性甲狀腺疾病中的表達及意義.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、背景與目的:
   趨化因子(Chemokines)是一組多達50多種的低分子量多肽,它們的分子結構前端均有四個半胱氨酸,目前根據(jù)前兩個半胱氨酸間是否存在其他氨基酸而被分為四個家族,即CC、CXC、C及CX3C(X代表其他任何氨基酸)。趨化因子能趨化淋巴細胞、單核細胞、中性粒細胞等各種白細胞向炎癥部位聚集,介導了免疫細胞對組織的浸潤、定位及活化,并具有趨化淋巴細胞并形成淋巴濾泡的功能,它們的表達是導致自身免疫性疾病發(fā)生發(fā)展的一個

2、重要因素。
   巨噬細胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)、巨噬細胞炎性蛋白-1β(MIP-1β)和單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)是體內(nèi)一些重要的趨化因子,已證實其參與了多種自身免疫性疾病的發(fā)生和發(fā)展。Graves病(GD)和橋本甲狀腺炎(HT)是臨床上常見的自身免疫性甲狀腺疾病,以甲狀腺內(nèi)有大量淋巴細胞浸潤和甲狀腺自身抗體形成為特征。MIP-1α、MIP-1β和MCP-1是否參與了自身免疫性甲狀腺疾病的發(fā)生發(fā)展,目前國內(nèi)尚無

3、人研究,國外也研究較少。本研究應用SP(Streptavidin/Peroxidase)免疫組化方法觀察MIP-1α、MIP-1β和MCP-1在GD、HT、甲狀腺腺瘤、結節(jié)性甲狀腺腫及正常甲狀腺組織中的表達情況,應用ELISA方法檢測患者血清趨化因子水平,并與患者術前血清中甲狀腺自身抗體進行相關性分析,以探討這些趨化因子在自身免疫性甲狀腺疾病發(fā)生發(fā)展中的作用。
   方法:
   收集自2009-2011年在我院住院的甲

4、狀腺手術患者的甲狀腺組織標本及術前血清,其中GD組44例(男33例,女11例),年齡(33.4±1.51)歲;TH組19例(男0例,女19例),年齡(47.4±2.24)歲;結節(jié)性甲狀腺腫組10例(男4例,女6例),年齡(55.1±3.32)歲;甲狀腺腺瘤組14例(男4例,女10例),年齡(42.3±4.07)歲,正常對照組8例(男2例,女6例),年齡(43.3±3.08)歲,標本為取自甲狀腺腺瘤周圍正常組織。另取8例(男3例,女5例)

5、,年齡(40.3±1.08)歲,在體檢科體檢健康者,抽取血液標本檢測趨化因子作為正常對照。納入標準:所有病例均經(jīng)臨床、實驗室檢查及病理診斷確診;排除標準:排除近期有感染史、女性妊娠、腫瘤、肺部疾病、心血管疾病、器官移植及其他免疫炎性疾病。所有組織標本經(jīng)固定、脫水、包埋后切片行HE和免疫組織化學染色,每張切片隨機選擇互不重疊的10個高倍鏡視野,結果判定:細胞質內(nèi)含黃色顆粒為陽性細胞。細胞陽性率評分標準:細胞陽性率<5%為0分;5%~25%

6、為1分;>25%~50%為2分;>50%~75%為3分;>75%為4分)。染色強度評分標準:無染色為0分;淡黃色為1分;棕黃色為2分;棕褐為3分。將細胞陽性率評分與染色強度評分的的乘積作為該標本被檢趨化因子表達強度的評分。表達強度評分標準:0分為陰性(-);1~2分為弱陽性(+);3~6分為陽性(++);>6為強陽性(+++)。所有血清標本采用雙抗體夾心法測定標本中三種趨化因子濃度并收集患者術前血清TGAb、TPOAb、TRAb的檢測結

7、果。所有數(shù)據(jù)均采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件包分析,陽性表達采用等級資料的非參數(shù)檢驗,定量資料的比較采取非參數(shù)檢驗,相關性分析采用Spearman等級相關分析,P<0.05(雙側)為差異有統(tǒng)計學意義。
   結果:
   應用SP免疫組化法檢測44例GD、19例HT、14例甲狀腺腺瘤、10例結節(jié)性甲狀腺腫和8例正常甲狀腺組織中MIP-1α、MIP-1β和MCP-1的表達情況。結果顯示:在GD和HT組織中,MIP-1α、MI

8、P-1β和MCP-1陽性表達信號主要位于甲狀腺濾泡上皮細胞的細胞質,呈淡黃色、棕黃色或黃褐色。在TH組織中,可見甲狀腺濾泡上皮細胞胞核及部分淋巴濾泡生發(fā)中心淋巴細胞亦有陽性表達,被大量淋巴細胞和漿細胞浸潤的間質中殘存的甲狀腺濾泡細胞團幾乎全部表達,HE染色為嗜酸性變的細胞表達強度更高,染色呈棕褐色團塊狀。MIP-1α、MIP-1β和MCP-1在甲狀腺腺瘤和結節(jié)性甲狀腺腫中的表達呈中低度表達,染色呈黃色或淺黃色,MIP-1α、MIP-1β

9、和MCP-1在正常甲狀腺組織中幾乎不表達,極少的上皮細胞呈淺黃色,MIP-1α、MIP-1β和MIP-1α、MIP-1β和MCP-1在GD、HT組織中表達明顯高于正常甲狀腺組織、結節(jié)性甲狀腺腫及甲狀腺腺瘤(P<0.05)。而在GD與HT組之間相比無顯著性差異(P>0.05)。其在正常甲狀腺組織、結節(jié)性甲狀腺腫及甲狀腺腺瘤間的表達亦無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。
   Spearman相關分析顯示,GD患者甲狀腺內(nèi)MIP-1α的表

10、達程度與血清TRAb值呈正相關(r=0.504,P<0.05),與血清TGAb值呈正相關(r=0.365,P<0.05),與TPOAb亦密切正相關(r=0.561,P<0.05);其MIP-1β的表達程度與血清TRAb值呈正相關(r=0.419,P<0.05),與血清TGAb值呈正相關(r=0.434,P<0.05),與TPOAb亦密切正相關(r=0.491,P<0.05);MCP-1的表達程度與血清TRAb值呈正相關(r=0.482,

11、P<0.05),與血清TGAb值呈正相關(r=0.398,P<0.05),與TPOAb呈密切正相關(r=0.456,P<0.05);HT患者甲狀腺內(nèi)MIP-1α的表達程度與血清TGAb值呈正相關(r=0.501,P<0.05),與TPOAb呈密切正相關(r=0.397,P<0.05);其MIP-1β的表達分布與血清TGAb值呈正相關(r=0.536,P<0.05),與TPOAb呈密切正相關(r=0.426,P<0.05);MCP-1的表

12、達分布與血清TGAb值呈正相關(r=0.501,P<0.05),與TPOAb呈密切正相關(r=0.397,P<0.05)。
   應用ELISA檢測各組病例血清MIP-1α、MIP-1β、MCP-1水平(見表6),血清MIP-1α水平在各組間差異無統(tǒng)計學意義(X2=0.326,P>0.05)。血清MIP-1β水平在各組間差異無統(tǒng)計學意義(X2=2.600,P>0.05)。血清MCP-1水平在各組間差異亦無統(tǒng)計學意義(X2=5.6

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