1、隨著人口的老齡化，心血管疾病的發(fā)病率逐年升高，對(duì)人類(lèi)的健康造成了嚴(yán)重的威脅。心律失常是心血管疾病中重要的一組疾病。它可單獨(dú)發(fā)病，亦可隨其他心血管疾病伴發(fā)。雖然近年來(lái)在心律失常的藥物治療上已取得很大的進(jìn)展，但是由于大多數(shù)抗心律失常藥物都有嚴(yán)重的致心律失常作用，心律失?；颊叩乃劳雎嗜匀惠^高。相關(guān)數(shù)據(jù)顯示，在眾多心臟疾患中，80％的心源性猝死都來(lái)源于心律失常。因此，對(duì)新型的、有效的、毒副作用小的抗心律失常藥物的研發(fā)已成為當(dāng)前治療心臟疾患領(lǐng)域中

2、最為重要的內(nèi)容之一。近年來(lái)，中藥制劑對(duì)心血管疾病的治療已逐漸應(yīng)用于臨床。中草藥歷經(jīng)了數(shù)千年的應(yīng)用實(shí)踐以及不斷改善，具有成本低、安全性高的優(yōu)點(diǎn)。但是由于中藥制劑成分繁雜，各成分間的相互生物活性作用大多不清楚，使得其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)很難提高，導(dǎo)致了中藥制劑很難與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)接軌。而中草藥提取物單體不僅保留了中藥低成本、毒副作用小的優(yōu)點(diǎn)，而且其具有明確的化學(xué)組成，便于藥物的分析與應(yīng)用。因此，以中草藥提取單體為研究對(duì)象，探索藥效高、成本低、毒副作用小的新型

3、抗心律失常藥物具有重大的理論和實(shí)際意義。在本課題中，我們從黃芩苷、蘆薈苷、三七皂苷R1、銀杏內(nèi)酯B、芹菜素以及魚(yú)腥草素鈉等多種具有心臟保護(hù)作用的中草藥提取物中通過(guò)實(shí)驗(yàn)篩選出蘆薈苷和魚(yú)腥草素鈉這兩種單體，研究其對(duì)兔心室肌細(xì)胞各種跨膜離子通道電流和收縮力以及Langendorff-灌流心臟的作用，以探討這兩種中藥提取物的抗心律失常作用。本課題主要分為以下三個(gè)部分進(jìn)行探討:
　　第一部分 影響兔心室肌細(xì)胞鈉、鉀和鈣電流中草藥單體的篩選<

4、br>　　我們通過(guò)研究黃芩苷、蘆薈苷、三七皂苷R1、銀杏內(nèi)酯B、芹菜素、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rg2以及魚(yú)腥草素鈉等具有心臟保護(hù)作用的中草藥提取單體對(duì)兔心室肌細(xì)胞峰鈉電流(INaP)、內(nèi)向整流鉀電流(IK1)和L-型鈣電流(ICaL)的影響來(lái)篩選潛在的、具有開(kāi)發(fā)價(jià)值的抗心律失常藥物。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示黃芩苷、三七皂苷R1、銀杏內(nèi)酯B、芹菜素、人參皂苷Rg1以及人參皂苷Rg2等對(duì)INa.P、IK1和ICaL均無(wú)顯著作用，而蘆薈苷和魚(yú)腥草素鈉對(duì)

5、INa.P和ICa.L均有一定影響。因此，我們將通過(guò)進(jìn)一步的細(xì)胞水平以及器官水平的實(shí)驗(yàn)研究來(lái)探索蘆薈苷和魚(yú)腥草素鈉的潛在的抗心律失常作用。
　　第二部分 蘆薈苷通過(guò)調(diào)節(jié)電壓門(mén)控型離子通道抑制室性心律失常
　　目的:探討蘆薈苷對(duì)兔心室肌細(xì)胞動(dòng)作電位(AP)以及各種跨膜離子通道電流的作用，并通過(guò)探究其對(duì)Langendorff-灌流心臟的作用來(lái)明確蘆薈苷的抗心律失常作用，為開(kāi)發(fā)新型的抗心律失常藥物奠定電生理學(xué)基礎(chǔ)。
　　方法

6、:通過(guò)酶解法進(jìn)行兔心室肌細(xì)胞的分離，利用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)記錄已分離的單個(gè)心室肌細(xì)胞的AP及心室肌細(xì)胞主要離子通道電流。分別使用?？舅丌?ATXⅡ)和高鈣誘導(dǎo)心室肌細(xì)胞產(chǎn)生早期后除極(EADs)和延遲后除極(DADs)等細(xì)胞性心律失常，并用烏頭堿誘導(dǎo)Langendorff-灌流心臟心律失常的發(fā)生。然后觀察比較蘆薈苷干預(yù)前后的AP、EADs、DADs、各種離子通道電流以及Langendorff-灌流心臟心律失常的變化。
　　結(jié)果:1

7、00μmol/L和200μmol/L蘆薈苷可顯著地縮短兔心室肌細(xì)胞的動(dòng)作電位時(shí)程(APD)，并減小其最大上升速率(Vmax)以及APD的反向頻率依賴(lài)性。200μmol/L蘆薈苷能夠有效地消除ATXⅡ誘導(dǎo)產(chǎn)生的兔心室肌細(xì)胞EADs和高鈣誘導(dǎo)產(chǎn)生的DADs。除此之外，蘆薈苷可濃度依賴(lài)性的抑制ICaL和INa.P，其半抑制濃度(IC50)分別為137.06μmol/L和559.80μmol/L。100μmol/L和200μmol/L蘆薈苷對(duì)A

8、TXⅡ誘導(dǎo)增大晚鈉電流(INaL)的抑制率分別為36.6±3.3％和71.8±6.5％。然而，100μmol/L和800μmol/L蘆薈苷對(duì)IK1以及快速激活的延遲整流鉀電流(IKr)沒(méi)有明顯的作用。進(jìn)一步的器官水平研究顯示200μmol/L蘆薈苷可抑制烏頭堿誘導(dǎo)Langendorff-灌流心臟心律失常的發(fā)生。
　　結(jié)論:蘆薈苷可有效地消除兔心室肌細(xì)胞的EADs和DADs、抑制ICaL、INa.P以及ATXⅡ誘導(dǎo)增大的INaL，并

9、且蘆薈苷還能抑制烏頭堿誘導(dǎo)的Langendorff-灌流心臟心律失常的發(fā)生。因此，蘆薈苷有潛力成為一種低成本、安全性高的抗心律失常藥物。
　　第三部分 魚(yú)腥草素鈉通過(guò)調(diào)節(jié)心室肌細(xì)胞門(mén)控性離子通道及收縮力發(fā)揮其心臟保護(hù)作用
　　目的:研究魚(yú)腥草素鈉對(duì)兔心室肌細(xì)胞主要跨膜離子通道及收縮力的作用，以探討?hù)~(yú)腥草素鈉的潛在抗心律失常作用。
　　方法:在使用酶解法分離心室肌細(xì)胞后，利用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)記錄心室肌細(xì)胞的INa.P、I

10、NaL和ICaL，并用可視化動(dòng)緣探測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)心室肌細(xì)胞的收縮力。觀察魚(yú)腥草素鈉干預(yù)前后心室肌細(xì)胞各離子通道電流及收縮力的變化，以探討?hù)~(yú)腥草素鈉的抗心律失常潛力。
　　結(jié)果:魚(yú)腥草素鈉可濃度依賴(lài)性地抑制INaP，其IC50為78.89±5.68μmol/L，50μmol/L和100μmol/L的魚(yú)腥草素鈉對(duì)ATX Ⅱ誘導(dǎo)增大INa.L的抑制率分別為30.1％和57.1％。其次，魚(yú)腥草素鈉還可濃度依賴(lài)性地增大兔心室肌細(xì)胞ICa.L，其