1、暨南大學(xué)博士學(xué)位論文 暨南大學(xué)博士學(xué)位論文 暨南大學(xué)博士學(xué)位論文 暨南大學(xué)博士學(xué)位論文 題名 （中英對(duì)照） ： AKR1B10 表達(dá)參與鼻咽癌發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制研究 AKR1B10 promotes nasopharyngeal carcinoma development and its molecular mechanism 作者姓名：張振林 指導(dǎo)教師姓名及學(xué)位、職稱：唐發(fā)清 博士 教授 學(xué)科、

2、專業(yè)名稱：病理學(xué)與病理生理學(xué) 學(xué)位類型 學(xué)位類型 學(xué)位類型 學(xué)位類型： ： ： ：科學(xué) 科學(xué) 科學(xué) 科學(xué)學(xué)位 學(xué)位 學(xué)位 學(xué)位 論文提交日期： 論文答辯日期： 答辯委員會(huì)主席： 論文評(píng)閱人： 學(xué)位授予單位和日期： I摘 摘 摘 摘 要 要 要 要 目的 目的 目的 目的： ： ： ： 鼻咽癌（Nasopharyngeal carcinom

3、a，NPC）是好發(fā)于我國(guó)南方及東南亞地區(qū)最為常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，其年發(fā)病率在 30~80/10 萬(wàn)，尤其以廣東為甚。臨床上鼻咽癌以高轉(zhuǎn)移、高復(fù)發(fā)和低分化為顯著特征，將近 88.0%的鼻咽癌患者初診時(shí)已有頸部淋巴轉(zhuǎn)移， 頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移被視為鼻咽癌發(fā)病的顯著特征之一。 鼻咽癌發(fā)生發(fā)展是一個(gè)多因素、多步驟的復(fù)雜過(guò)程，EB 病毒感染及其他多種非病毒因素（如化學(xué)致促癌物）參與鼻咽癌發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移。新近研究發(fā)現(xiàn)，醛酮還原酶家族 1 成員 B10（A

4、KR1B10，Aldo-keto reductase 1B10）在鼻咽癌發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移中起促進(jìn)作用，但 AKR1B10 參與鼻咽癌轉(zhuǎn)移的確切分子機(jī)理仍不清楚。二亞硝基哌嗪（DNP ，N, N'-Dinitrosopiperazine）是鼻咽癌非病毒因素（如化學(xué)致促癌物）的致病因子之一。前期研究發(fā)現(xiàn)，DNP 通過(guò)活化多個(gè)信號(hào)分子，促進(jìn)鼻咽癌細(xì)胞侵襲遷移， AKR1B10 是其中的一個(gè)重要分子， 推斷 DNP 可以介導(dǎo) AKR1B

5、10 表達(dá)參與鼻咽癌轉(zhuǎn)移。 本文首先采用免疫組織化學(xué)和酶聯(lián)免疫吸附的方法，分析了 AKR1B10 在鼻咽癌組織和血清中的表達(dá)情況，從組織和血清學(xué)的層面明確 AKR1B10 表達(dá)與鼻咽癌發(fā)生發(fā)展及轉(zhuǎn)移的關(guān)系。然后，應(yīng)用分子克隆技術(shù)、基因轉(zhuǎn)染技術(shù)、基因干擾技術(shù)、Real-time PCR 技術(shù)和 Western Blotting技術(shù)等探討 DNP 對(duì)鼻咽癌細(xì)胞 AKR1B10 表達(dá)的影響， 明確 DNP 上調(diào) AKR1B10表達(dá)促進(jìn)鼻咽癌細(xì)

6、胞的侵襲轉(zhuǎn)移。最后，從細(xì)胞生物學(xué)功能角度進(jìn)行研究，采用克隆形成試驗(yàn)、Transwell 遷移和侵襲試驗(yàn)等考察 DNP 通過(guò)介導(dǎo) AKR1B10 表達(dá)對(duì)鼻咽癌細(xì)胞生物學(xué)功能和行為的影響，從而闡明 DNP 可以誘導(dǎo) AKR1B10 表達(dá)參與鼻咽癌轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制， 為探討鼻咽癌高轉(zhuǎn)移的分子機(jī)理以及鼻咽癌篩查診斷的血清標(biāo)志物、 轉(zhuǎn)移的檢測(cè)和靶向治療候選分子的篩選提供有價(jià)值的參考和依據(jù)。 方法 方法 方法 方法： ： ： ： （1）免疫組化檢測(cè)鼻