長(zhǎng)春花突變愈傷組織的培養(yǎng)及其藥用成分的研究.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、本實(shí)驗(yàn)室以秋水仙堿處理藥用植物長(zhǎng)春花(Catharanthus roseus)的愈傷組織得到了突變愈傷組織。突變愈傷組織從表觀特征、染色體數(shù)目、顯微結(jié)構(gòu)、生物產(chǎn)量、藥用成分含量等方面都有別于普通愈傷組織。它的生長(zhǎng)速率和藥用成分含量明顯高于普通愈傷組織,并且通過(guò)RP-HPLC分析,還含有普通愈傷組織沒(méi)有的未知成分。所以,長(zhǎng)春花突變愈傷組織可能成為更適用于工業(yè)化生產(chǎn)長(zhǎng)春花藥用成分的理想材料。
   本文以突變愈傷組織為實(shí)驗(yàn)材料,采用

2、RP-HPLC測(cè)定法,圍繞提高長(zhǎng)春質(zhì)堿和阿瑪堿含量,重點(diǎn)開(kāi)展了突變愈傷組織的培養(yǎng)條件優(yōu)化、吲哚生物堿的增產(chǎn)處理、未知成分的鑒定和突變愈傷組織植株再生等方面的研究。
   培養(yǎng)條件的優(yōu)化研究發(fā)現(xiàn):光培養(yǎng)既有利于突變愈傷組織生長(zhǎng)又有利于長(zhǎng)春質(zhì)堿、阿瑪堿的積累;pH6.5的培養(yǎng)基最適于突變愈傷組織的生長(zhǎng)和長(zhǎng)春質(zhì)堿、阿瑪堿的積累;綜合生物產(chǎn)量和吲哚總堿含量?jī)煞矫婵紤],蔗糖較葡萄糖更適合作為碳源,且40 g·L-1蔗糖處理的突變愈傷組織中

3、長(zhǎng)春質(zhì)堿達(dá)到65.53μg·g-1FW,是對(duì)照的6倍多;隨繼代次數(shù)的增加,吲哚生物堿呈現(xiàn)出先上升后下降的變化趨勢(shì)。
   植物生長(zhǎng)物質(zhì)2,4-D的存在對(duì)于突變愈傷組織的生長(zhǎng)和吲哚生物堿的積累有一定的抑制作用;KT對(duì)突變愈傷組織生長(zhǎng)和藥用成分積累的作用優(yōu)于6-BA;ABA抑制了突變愈傷組織的生長(zhǎng),但有利于吲哚總堿包括阿瑪堿和長(zhǎng)春質(zhì)堿的積累;乙烯利對(duì)生物產(chǎn)量和吲哚生物堿的積累都有促進(jìn)作用。
   吲哚生物堿合成的前體物質(zhì)色氨

4、酸、鈣和鋅離子、有機(jī)化合物NAE12和NAE18對(duì)吲哚生物堿積累均有不同程度的正向調(diào)節(jié)作用。其中1mg·L-1的NAE18對(duì)吲哚生物堿的積累有明顯的促進(jìn)作用,長(zhǎng)春質(zhì)堿的含量是對(duì)照的7倍。
   利用RP-HPLC分離純化了未知成分,通過(guò)HPLC-MS分析檢測(cè)未知成分的分子量是239,并通過(guò)二級(jí)碎片分析,含有一個(gè)分子量為161的基團(tuán),由于抗癌藥物的前體之一文多靈中也含有一個(gè)分子量為161的基團(tuán),推斷未知成分可能與文多靈有一定的關(guān)系

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