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文檔簡介
1、I摘要玉米產(chǎn)量高,用途廣,因此發(fā)展玉米生產(chǎn)對改善人民生活和農(nóng)村經(jīng)濟都具有十分重要的意義。在玉米生產(chǎn)過程中,溫度、干旱、鹽漬等都是重要的外界影響因素。然而,近年來溫室效應加劇,全球氣候變暖導致了極端高溫天氣,對玉米生長發(fā)育和產(chǎn)量構(gòu)成了極大影響。隨著基因工程育種技術的快速發(fā)展,通過基因工程技術提高作物在逆境脅迫下的耐受力,培育具有較強抗性的作物新品種,已成為目前植物抗逆遺傳改良的一個研究熱點。研究發(fā)現(xiàn),植物在受到脅迫時,轉(zhuǎn)錄因子被誘導,并啟
2、動下游功能基因的表達,從而提高植物對脅迫的耐受性。目前,盡管模式植物擬南芥和番茄的熱激轉(zhuǎn)錄因子研究取得了一些重要的進展,但是對于玉米熱激轉(zhuǎn)錄因子的功能卻知之甚少。因此,本研究通過分子生物學手段,通過PCR技術獲得了玉米熱激轉(zhuǎn)錄因子ZmHsf17,利用轉(zhuǎn)基因技術產(chǎn)生了轉(zhuǎn)基因水稻植株并對其功能進行了初步分析,獲得了如下結(jié)果:1.對玉米熱激轉(zhuǎn)錄因子基因家族進行了分析,基于系統(tǒng)進化和熱激誘導表達分析結(jié)果,篩選并從玉米自交系B73基因組中克隆到了
3、一個受熱激誘導表達的候選基因:ZmHsf17。序列分析顯示,ZmHsf17基因cDNA全長為1125bp,編碼375個氨基酸。2.生物信息學分析發(fā)現(xiàn)在ZmHsf17基因起始密碼子ATG上游636648bp間存在一個保守的HSE順式作用元件,其啟動子中含有ABRE、DRE和LTRE元件。3.誘導表達模式結(jié)果顯示ZmHsf17不僅受熱激脅迫誘導,還可以響應ABA、干旱、鹽冷和雙氧水的誘導。組織表達模式分析結(jié)果顯示,ZmHsf17在玉米組織中
4、廣泛表達,在葉片中的表達量最高。4.煙草瞬時表達實驗結(jié)果顯示,ZmHsf17定位在細胞核中。轉(zhuǎn)錄活性分析結(jié)果發(fā)現(xiàn),ZmHsf17沒有自激活活性,這與熱激轉(zhuǎn)錄因子A2亞族的特性一致。5.通過組織培養(yǎng)的方法產(chǎn)生了過量表達ZmHsf17的轉(zhuǎn)基因水稻植株,與對照植株相比,過表達植株在生長發(fā)育過程中沒有明顯差異;然而,受到熱激處理后,ZmHsf17轉(zhuǎn)基因水稻植株表現(xiàn)出較強的耐熱性。ABA敏感性實驗結(jié)果顯示,ZmHsf17過表達轉(zhuǎn)基因植株對外源AB
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