1、碘（Indine）是人體必需微量元素之一，人體碘缺乏或碘過量都有可能引起相應(yīng)的疾病。大量流行病學(xué)資料和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)提示高碘可引起以學(xué)習(xí)記憶損害為主的神經(jīng)毒性，但其引起神經(jīng)毒性的途徑機(jī)制仍不清楚。自噬是細(xì)胞的代謝方式之一，它可以通過如清除細(xì)胞內(nèi)大分子物質(zhì)、代謝產(chǎn)物等方式保護(hù)受損細(xì)胞；但過度的自噬則有可能引發(fā)細(xì)胞死亡，稱為自噬性死亡或Ⅱ型程序性細(xì)胞死亡（Ⅱ-Programmol/Led Cell Death,Ⅱ-PCD）。有關(guān)高碘神經(jīng)毒性的一系

2、列研究結(jié)果也表明，高碘可使動(dòng)物腦組織產(chǎn)生自由基，降低抗氧化酶活性以及引起DNA損傷，而這些改變都可以誘導(dǎo)自噬發(fā)生，但自噬在高碘神經(jīng)毒性中的作用尚未見報(bào)道。本研究以人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞（SH-SY5Y細(xì)胞）為研究對象，研究高濃度碘對SH-SY5Y細(xì)胞自噬水平的影響，探討自噬在高碘所致SH-SY5Y細(xì)胞死亡中的作用，為進(jìn)一步研究高碘的神經(jīng)毒性提供依據(jù)。
　　第一部分：高碘對SH-SY5Y細(xì)胞自噬水平的影響
　　目的：研究高濃度碘化

3、物對SH-SY5Y細(xì)胞自噬水平的影響
　　方法：不同濃度KI（0、10、20、30 mmol/L）處理SH-SY5Y細(xì)胞24 h后，采用 CCK-8法檢測細(xì)胞活力；使用透射電子顯微鏡觀察自噬體結(jié)構(gòu)，多功能酶標(biāo)儀檢測細(xì)胞內(nèi)自噬囊泡示蹤劑丹酰戊二胺（Monodansylcadaverine, MDC）熒光強(qiáng)度；并采用PCR和Western blot方法分別檢測自噬相關(guān)分子LC3、Beclin1和p62在基因和蛋白水平的表達(dá)情況，觀察K

4、I對于自噬相關(guān)基因和蛋白的劑量-效應(yīng)關(guān)系。
　　結(jié)果：CCK-8結(jié)果顯示，10 mmol/L KI染毒組細(xì)胞存活率與對照組相比較無差異（P>0.05），20 mmol/L KI染毒組細(xì)胞存活率與對照組和10 mmol/L染毒組相比明顯下降（P<0.05），30 mmol/L KI染毒組細(xì)胞存活率與其余三組相比較顯著下降（P<0.05）。電鏡結(jié)果顯示，對照組未見異常變化，10 mmol/L染毒組細(xì)胞內(nèi)可見輕微的線粒體擴(kuò)張但未見明顯的

5、雙層膜自噬體結(jié)構(gòu)，20 mmol/L染毒組細(xì)胞內(nèi)可見明顯的線粒體腫脹及雙層膜自噬體結(jié)構(gòu)，在30 mmol/L染毒組中以上改變更加明顯。20、30 mmol/L KI染毒組MDC熒光強(qiáng)度比對照組明顯上升（P<0.05），而10 mmol/L KI染毒組無明顯差異。與對照組相比，30 mmol/L KI染毒組自噬相關(guān)基因和蛋白LC3、Beclin1和p62表達(dá)均明顯上升（P<0.05），而10、20 mmol/L KI染毒組中LC3、Bec

6、lin1和p62表達(dá)與對照組無差異（P>0.05）。
　　結(jié)論：一定劑量的KI可致SH-SY5Y細(xì)胞死亡，能誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞發(fā)生自噬，且二者存在著劑量依賴性的自噬相關(guān)分子表達(dá)的上調(diào)。
　　第二部分：自噬在高濃度碘化物神經(jīng)毒性中的作用
　　目的：探討自噬在高濃度碘化物神經(jīng)毒性中所發(fā)揮的作用
　　方法：應(yīng)用1 mmol/L3-甲基腺嘌呤（3-MA）或200μmol/L N-乙酰半胱氨酸（NAC）與30 mmol

7、/L KI同時(shí)處理細(xì)胞，24 h后檢測自噬相關(guān)分子LC3、Beclin1和p62的表達(dá)變化；以不同濃度（0、10、20、30 mmol/L）KI和1 mmol/L3-MA共同處理細(xì)胞，24 h后運(yùn)用CCK-8法檢測細(xì)胞活力。
　　結(jié)果：與單純30 mmol/L KI染毒組相比，30 mmol/L KI+3-MA和30 mmol/L KI+NAC干預(yù)組的自噬相關(guān)基因和蛋白的表達(dá)均明顯下降（P<0.05）；施加干預(yù)后，20、30 mm