1、目的:肝切除術(shù)是肝膽外科中肝臟疾病的主要治療手段之一。然而肝切除術(shù)后可發(fā)生如膽道損傷、切口感染、膽漏、術(shù)后腹腔出血、肝功能衰竭等并發(fā)癥，其中肝功能衰竭是肝切除術(shù)后主要并發(fā)癥，也是圍手術(shù)期死亡的主要原因。骨髓間充質(zhì)干細胞(Bonemarrowmesenchymalstemcells，BMSCs)具有多向分化潛能，在一定的微環(huán)境下可以向肝細胞分化，同時可以分泌多種細胞因子，促進損傷肝組織修復(fù)，已用于多種肝臟疾病的治療。然而，BMSCs用于肝

2、切除術(shù)的研究較少。本實驗通過MRI示蹤磁標記的BMSCs在肝切除術(shù)模型內(nèi)的存活、分布及遷徙情況，來觀測BMSCs對肝切除術(shù)的作用。
　　 方法:采用全骨髓培養(yǎng)法分離培養(yǎng)BMSCs，流式細胞儀測定其表面分子。對不同SPIO濃度標記的BMSCs進行臺盼藍染色，來測定標記后的細胞活性。采用MTT法檢測不同濃度SPIO對BMSCs增殖的影響。對不同SPIO濃度標記的BMSCs進行普魯士藍染色，來測定標記率。建立SD大鼠70％肝切除模型。

3、將SD大鼠分為四組:A組為肝切除對照組;B組為肝局部移植組;C組為脾內(nèi)移植組;D組為正常對照組，觀測術(shù)后SD大鼠一般情況及谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶的變化，并行MRI成像，分析結(jié)果。
　　 結(jié)果:取第3代BMSCs，流式細胞儀檢測其相應(yīng)抗體，結(jié)果顯示:CD29細胞計數(shù)陽性率為97.36％，CD90細胞計數(shù)陽性率為99.61％，CD45細胞計數(shù)陽性率為2.2％。臺盼藍染色顯示:第1、3、5、7d時，0μg/ml、25μg/ml、50μ

4、g/ml、75μg/ml和100μg/ml濃度組細胞活力差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)，但隨著標記濃度的升高，細胞活力有逐漸減低的趨勢。行MTT檢測后，得出SD大鼠BMSCs倍增時間為(36.78±2.48)h，25μg/mlSPIO磁標記后倍增時間為(33.16±1.64)h，50μg/mlSPIO磁標記后倍增時間為(34.78±1.67)h，75μg/mlSPIO磁標記后倍增時間為(37.44±3.50)h，100μg/mlSPI

5、O磁標記后倍增時間為(36.87±3.56)h。5組數(shù)據(jù)間無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。普魯士藍染色顯示:25μg/ml、50μg/ml、75μg/ml和100μg/ml濃度組間標記率差異相比不具有統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)，而標記濃度為12.5μg/ml與以上四組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)。術(shù)后肝功檢測示:術(shù)后1d各組大鼠ALT、AST水平均達到最高峰，之后逐漸下降，且在1d～3d內(nèi)下降速度最快，術(shù)后7d可趨于正常水平。B組、C

6、組術(shù)后1d、3d和7d時ALT、AST水平均明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，同時B組、C組ALT、AST水平先于A組趨于正常。在術(shù)后1d、3d、7d時B組和C組間ALT、AST水平無顯著意義(P＞0.05)。術(shù)后MRI成像示:肝切除術(shù)后3d，B組與C組SD大鼠在MRI的GRET2*WI序列上肝臟內(nèi)出現(xiàn)彌漫性顆粒狀特異性低信號改變。術(shù)后7d觀察到肝臟內(nèi)低信號區(qū)域范圍變大，信號強度(SI)減低。但隨著移植時間延長，信號減低

7、程度逐漸減輕。對不同組、不同時相肝臟區(qū)在MRI下的GRET2*WI序列所獲得的SI值進行統(tǒng)計學(xué)分析，結(jié)果表明，各組術(shù)后3d、7d與14d肝臟區(qū)SI值無顯著性差異(P＞0.05)，但B組與C組SI值有隨時間減低的趨勢;A組SI值與B組或C組SI值比較均有顯著性差異(P＜0.05)，B組SI值與C組SI值差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)論:全骨髓培養(yǎng)法仍是目前提取SD大鼠BMSCs的簡單、有效的方法;SPIO標記BMSCs的適宜濃度為2