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![殼寡糖誘導(dǎo)交鏈孢菌細(xì)胞凋亡及毒素抑制的研究.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/14/17/e30677a2-4a97-45c7-980e-4924610cbdcc/e30677a2-4a97-45c7-980e-4924610cbdcc1.gif)
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1、殼寡糖是一種水溶性低聚糖,具有良好的生物兼容性,可生物降解并對(duì)人畜無(wú)毒,其抑菌活性在植物病害防治、食品防腐以及醫(yī)療等方面具有廣闊的應(yīng)用前景。目前對(duì)殼寡糖作用機(jī)理的研究主要集中于其誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗病性方面,在殼寡糖抑制病原真菌機(jī)理方面還報(bào)道較少。交鏈孢菌是侵染范圍很廣的一種侵染性真菌,在造成危害的同時(shí),產(chǎn)生多種真菌毒素,采后番茄果實(shí)可受其侵染而發(fā)生黑霉病。
本論文首先研究不同濃度的殼寡糖對(duì)菌絲生長(zhǎng)和孢子萌發(fā)的抑制現(xiàn)象,從而確定寡糖
2、對(duì)交鏈孢菌的生物學(xué)影響。結(jié)果表明,500μg/mL的殼寡糖抑菌效果最明顯,對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制率達(dá)到55.56%,對(duì)孢子萌發(fā)的抑制率達(dá)到78%。掃描電鏡觀察不同濃度的殼寡糖對(duì)交鏈孢菌絲和孢子均有破壞作用,處理組菌絲體管狀形態(tài)模糊,表面粗糙,甚至出現(xiàn)菌絲消融狀態(tài)。同樣處理組孢子破裂,完全變形,出現(xiàn)原生質(zhì)溢出現(xiàn)象。
其次通過(guò)對(duì)殼寡糖誘導(dǎo)交鏈孢菌的細(xì)胞凋亡過(guò)程進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)殼寡糖對(duì)交鏈孢菌原生質(zhì)體有致死作用。熒光顯微鏡觀察結(jié)果表明,殼寡
3、糖處理組線粒體膜電位下降,ROS水平顯著增高。在激光共聚焦顯微鏡下觀察殼寡糖與交鏈孢菌絲和孢子的結(jié)合,發(fā)現(xiàn)菌絲體和孢子整體熒光染色較均勻,但是在菌絲隔膜處出現(xiàn)熒光斷裂現(xiàn)象,隔膜未被染色,表明殼寡糖可能進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部與其DNA結(jié)合,凝膠阻滯作用驗(yàn)證結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)了該結(jié)論。
以體外提取交鏈孢菌毒素的方法研究殼寡糖與致病毒素的相互作用表明,殼寡糖處理組細(xì)胞存活率基本不受影響,而毒素處理組大部分均出現(xiàn)質(zhì)壁分離現(xiàn)象和死亡現(xiàn)象,且存活率<5
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