1、針對(duì)目前基于厭氧瓶的微生物降解評(píng)估方法效率低、操作繁瑣等缺點(diǎn)，本論文結(jié)合96孔板的高通量特性及酶標(biāo)儀的自動(dòng)檢測(cè)功能，利用染料充當(dāng)電子受體和指示劑，構(gòu)建了一種新型的厭氧脫色高通量無(wú)損評(píng)估體系。利用此體系評(píng)估了c型細(xì)胞色素CymA在模式產(chǎn)電微生物Shewanella oneidensis MR-1胞外呼吸中的作用，以及S.oneidensis MR-1對(duì)不同偶氮染料的胞內(nèi)外降解特性。論文主要研究?jī)?nèi)容如下:
　　(1)基于96孔板與酶標(biāo)

2、儀，構(gòu)建生物厭氧脫色高通量評(píng)估體系。在96孔板中，將待評(píng)測(cè)微生物菌株接種于含染料污染物的脫色培養(yǎng)基中，并于厭氧條件下密封培養(yǎng)。以酶標(biāo)儀作為自動(dòng)檢測(cè)器，對(duì)染料濃度變化進(jìn)行實(shí)時(shí)無(wú)損監(jiān)測(cè)。利用該體系評(píng)估了S.oneidensis MR-1野生型及Mtr通路蛋白缺失型突變體(△mtrA、△mtrB、△mtrC/omcA以及△cymA)對(duì)指示性偶氮染料甲基橙的厭氧脫色效能，驗(yàn)證了所構(gòu)建的高通量無(wú)損評(píng)估體系具有可行性。
　　(2)探討了Cym

3、A在S.oneidensis MR-1胞外電子跨膜傳遞中的作用。針對(duì)目前CymA對(duì)Mtr電子跨膜傳遞通路的作用研究中所存在的爭(zhēng)論，本論文以S.oneidensis MR-1及Mtr通路蛋白缺失型突變體為研究對(duì)象，以染料苯胺藍(lán)和甲基橙作為胞外呼吸的電子受體，證實(shí)了CymA對(duì)Mtr通路的重要性受胞外電子受體種類、電子受體濃度以及胞外電子傳遞速率等因素的影響。這些因素本質(zhì)上影響的是CymA到Mtr通路的電子傳遞，CymA的重要性也隨Mtr通路

4、對(duì)其電子傳遞需求的增加而加大。
　　(3)評(píng)估了Mtr通路對(duì)偶氮染料的胞內(nèi)、胞外降解脫色效能。利用兩種結(jié)構(gòu)不同的偶氮染料甲基紅和莧菜紅進(jìn)行S.oneidensis MR-1降解的評(píng)估。結(jié)果表明，甲基紅主要是胞內(nèi)降解，Mtr通路對(duì)其降解影響作用較小。而莧菜紅則因?yàn)榉肿訕O性較大難進(jìn)入細(xì)胞，主要依賴于Mtr通路跨膜傳遞的電子進(jìn)行還原，其降解受Mtr通路的影響較大。胞外電子遞質(zhì)核黃素對(duì)甲基紅的胞內(nèi)降解無(wú)顯著影響，卻能加速莧菜紅的降解。電子