利用不同啟動子在大腸桿菌與肺炎克協(xié)伯氏菌中合成PQQ的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、吡咯喹啉醌(PQQ)是參與氧化還原反應的輔因子,作為許多酶的輔酶,如脫氫酶,氧化酶,水合酶與脫羧酶。PQQ含有能直接參與氧化還原反應的鄰醌類結構,以上酶蛋白可以催化非磷酸化的底物發(fā)生氧化反應,如醇類,醛類和醛糖類。此外,PQQ還被認為是繼吡啶和核黃素之后的第三類參與氧化還原反應的輔因子。
   限已知與PQQ合成相關的基因有7個,在生物體內通常成基因簇。功能相近的基因具有一定同源性,并按一定順序排列為pqq基因簇。肺炎克雷伯氏菌

2、中, PQQ基因簇為一段pqqABCDEF的連續(xù)基因,約7Kb。本實驗以肺炎克雷伯氏桿菌(K.pneumoniae DSM2026)編碼PQQ基因簇作為模板,本實驗克隆了肺炎克雷伯氏菌中5.5kb的PQQ合成基因簇pqqABCDEF,利用不同啟動子,分別以大腸桿菌與肺炎克雷伯氏菌為宿主生物合成PQQ。采用NBT(氧化型)-甘氨酸鉀溶液非酶系統(tǒng)測定PQQ含量。并利用無細胞體系原理用細胞破碎液合成PQQ。實驗結果表明啟動子影響PQQ合成,通

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