1、腸出血性大腸桿菌(Enterohaemorrhagic Escherichia coli，EHEC)O157∶H7是一種重要的動物源性致病菌，易引起嬰幼兒及老人腹瀉、出血性結腸炎(HC)、血栓形成性血小板減少性紫癜(TTP)及溶血性尿毒綜合征(HUS)等嚴重并發(fā)癥，部分HUS病例可致死亡。該菌長期駐留于牛、羊、豬、雞等家畜家禽的腸道中，牛是主要的貯存宿主。該菌造成幼齡動物腹瀉，并污染畜禽產品及水源和農作物等，給農牧業(yè)帶來巨大的損失，也對

2、人們的健康構成巨大威脅。
　　 1.大腸桿菌O157∶H7的檢測和分離
　　 從南京各個地區(qū)采集新鮮樣品420份，其中糞便樣品350份，蔬菜50份，肉類10份，牛奶10份，增菌后，免疫磁珠富集，涂布篩選性培養(yǎng)基，菌株在改良山梨醇-麥康凱培養(yǎng)基(CT-SMAC)培養(yǎng)后菌落呈圓形、表面濕潤、半透明樣，挑取可疑菌落進行rfbE/fliC二重PCR，同時用O157和H7診斷血清做玻片凝集試驗進行鑒定。結果成功分離到5株出血性大腸

3、桿菌O157∶H7。所采集樣品的腸出血性大腸桿菌O157∶H7檢出率分別為8％、2％、0％、2％、2％。革蘭氏染色為陰性桿菌，并且有1株遲緩性發(fā)酵山梨醇麥康凱培養(yǎng)基。
　　 2.大腸桿菌O157∶H7分離株的鑒定
　　 設計毒力因子stx1、stx2、eae、hlyA和tccp相應引物，針對已分離的O157∶H7菌株進行PCR鑒定，并進行生化試驗和藥敏試驗。毒力基因檢測顯示:其中4株毒力因子表型為stx1-stx2+ea

4、e+hlyA+tccp+，另有一株表現(xiàn)型為stx1+stx2+eae+hlyA+tccp+，各菌tccp基因均為陽性，但攜帶的重復片段數(shù)量有差異。不同牛場的分離菌株的耐藥性差異較大，其中6#對氨芐青霉素、卡那霉素、先鋒V、鏈霉素有強的耐藥性。
　　 3.大腸桿菌O157∶H7分離株的小鼠致病性
　　 通過灌胃攻毒方式研究血性大腸桿菌O157∶H7對BALB/C小鼠致病性:選用八周齡小鼠，用鏈霉素處理小鼠，再分別以1×10